溶膠-凝膠法固定南極假絲酵母脂肪酶B的研究.pdf_第1頁
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文檔簡介

1、本文對溶膠—凝膠法固定脂肪酶CALB（南極假絲酵母脂肪酶B）進行了較為系統(tǒng)的研究，并通過添加保護劑和保護膜的方法對CALB分子進行保護。 首先，在水解酶活檢測方法上對傳統(tǒng)的橄欖油水解法進行改進，脂肪酶通過催化油酸乙酯乳化液水解生成游離油酸的量定義酶活，使用固定pH滴定法測定油酸量，使檢測結(jié)果更準確。 其次，研究了固定化過程中水含量、緩沖溶液pH值、交聯(lián)劑、酶原溶液的量對固定化酶活的影響。在酶分子的保護處理中采用兩種途

2、徑，一、篩選具有保護效果的糖分子作為保護添加劑融入酶原溶液中；二、引入脂質(zhì)體膜，將酶原溶液在卵磷脂與膽固醇混合溶液中進行保護預處理。并對固定化條件利用正交實驗進行了五因素四水平的優(yōu)化，得出固定化酶制備的適宜條件為：1mg脂肪酶CALB溶于60μLH2O中，加入10mg木糖制備成酶原溶液，取80μL酶原溶液與500μL正癸烷溶液（溶有1.5％膽固醇，6％卵磷脂）混合，充分振蕩分散后，傾入600μL固定化載體前驅(qū)體溶液（含有聚乙二醇PEG4

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