大鼠肝移植模型的磁共振彌散成像與氫質(zhì)子波譜成像研究.pdf

1、心臟停搏供體(NHBD)作為肝移植供肝來(lái)源的重要途徑之一，是目前關(guān)注的焦點(diǎn)。研究發(fā)現(xiàn)NHBD供體肝移植術(shù)后原發(fā)移植肝無(wú)功能的發(fā)生率較高，熱缺血再灌注損傷是主要的影響因素。在熱缺血再灌注損傷的病理生理過(guò)程中，肝細(xì)胞是主要的損傷靶點(diǎn)，枯否氏細(xì)胞的激活，氧自由基和細(xì)胞因子的大量釋放可能會(huì)促進(jìn)細(xì)胞外基質(zhì)的沉淀，也促進(jìn)損傷肝細(xì)胞的再生，病理表現(xiàn)為移植肝膠原纖維增多，肝細(xì)胞的再生能力的增強(qiáng)，目前關(guān)于這方面研究較少。磁共振彌散成像能夠定量檢測(cè)各種肝炎

2、后肝纖維化，氫質(zhì)子波譜成像的膽堿峰可用來(lái)反應(yīng)細(xì)胞的增牛能力。在本研究中，我們通過(guò)重建肝動(dòng)脈的大鼠原位肝移植模型，采用磁共振彌散成像和氫質(zhì)子波譜成像，結(jié)合組織病理分析，研究熱缺血再灌注損傷對(duì)于移植肝細(xì)胞外基質(zhì)的沉積以及肝細(xì)胞損傷后細(xì)胞再生能力的影響。 第一部分 重建肝動(dòng)脈的大鼠肝移植模型建立方法的實(shí)驗(yàn)研究 目的： 探討一種穩(wěn)定性好、重復(fù)性強(qiáng)的大鼠原位肝移植模型的建立方法。 方法：選用體重220g-260g

3、的健康、SPF級(jí)雄性SD大鼠。利用Kamada“二袖套法”吻合肝上下腔靜脈、肝下下腔靜脈和門靜脈。參照Lehmann所述方法將供體的腹腔動(dòng)脈與受體的肝總動(dòng)脈通過(guò)24G靜脈留置針自制動(dòng)脈支架吻合。采用夾閉心臟基底部的方法制作熱缺血模型。術(shù)后記錄肝移植供體手術(shù)時(shí)間，供肝修整時(shí)間、無(wú)肝期、受體手術(shù)時(shí)間、動(dòng)脈吻合時(shí)間、手術(shù)成功率(受體術(shù)后存活24小時(shí)以上)及術(shù)后并發(fā)癥和死亡原因等。術(shù)后6小時(shí)、第1天、3天、7天、14天及30天開(kāi)腹取肝組織時(shí)解剖

4、肝門處。 結(jié)論：利用支架法吻合供體腹腔動(dòng)脈及受體肝總動(dòng)脈的方法建立的重建肝動(dòng)脈血供的大鼠原位肝移植模型，操作簡(jiǎn)便、耗時(shí)短、通暢率高、對(duì)正常生理干擾小，是一種穩(wěn)定性好、可重復(fù)的重建肝動(dòng)脈血供的大鼠肝移植模型。無(wú)熱缺血組的移植手術(shù)成功率高于熱缺血組。 第二部分 磁共振彌散成像對(duì)于熱缺血再灌注損傷引起移植肝膠原纖維沉積的定量研究 目的： 采用第一部分制作的熱缺血和無(wú)熱缺血兩組大鼠原位肝移植模型，通過(guò)磁共振DW

5、I和組織學(xué)分析研究移植肝術(shù)后早期膠原纖維含量的變化，以及熱缺血對(duì)于術(shù)后移植肝膠原纖維沉積的影響。 方法：熱缺血組的大鼠肝移植模型和無(wú)熱缺血組大鼠肝移植模型各36只為研究對(duì)象，采用1.5T磁共振對(duì)移植術(shù)后各個(gè)時(shí)間點(diǎn)(6h、1d、3d、7d、14d、30d)每只大鼠行肝臟常規(guī)T1WI、T2WI成像及彌散成像(b值選取0,600,800及1000)。掃描后抽血測(cè)血清酶學(xué)(ALT、GGT、TBIL)代謝水平，然后取肝臟，進(jìn)行HE、Mas

6、son染色，對(duì)于匯管區(qū)炎癥細(xì)胞浸潤(rùn)程度進(jìn)行半定量評(píng)分，測(cè)定膠原纖維陽(yáng)性面積百分比，同時(shí)取材進(jìn)行透射電鏡分析。 結(jié)論：熱缺血再灌注損傷促進(jìn)了移植肝細(xì)胞外膠原纖維的沉積。DWI可以敏感、準(zhǔn)確的監(jiān)測(cè)大鼠移植肝細(xì)胞水腫和細(xì)胞外膠原纖維沉積的變化。血清酶學(xué)指標(biāo)及匯管區(qū)炎癥細(xì)胞浸潤(rùn)程度不能很好的反映移植肝膠原纖維的沉積的變化情況。 第三部分 氫質(zhì)子波譜成像對(duì)熱缺血再灌注損傷大鼠移植肝細(xì)胞再生能力的評(píng)價(jià)研究 目的：探

7、討磁共振氫質(zhì)子波譜評(píng)價(jià)大鼠原位肝移植熱缺血模型肝細(xì)胞損傷后再生能力的意義，以及熱缺血對(duì)于移植肝再牛能力的影響。 方法：以熱缺血組的大鼠肝移植模型和無(wú)熱缺血組大鼠肝移植模型各36只為研究對(duì)象，移植術(shù)后分6個(gè)時(shí)間點(diǎn)(6h、1d、3d、7d、14d、30d)對(duì)使用1.5T磁共振對(duì)每只大鼠的肝臟行常規(guī)T1WI、T2WI成像及氫質(zhì)子波譜掃描。1H-MRS檢查使用PRESS序列：TR/TE=1500msec/35msec。掃描后取肝臟，測(cè)定