IL-17在小鼠急性銅綠假單胞菌肺部感染模型中的作用研究.pdf

1、目的：本研究將探究白介素-17(interleukin-17，IL-17)和產(chǎn)IL-17γδT細胞在小鼠急性銅綠假單胞菌肺部感染模型中所起作用，為該類感染的免疫防治奠定理論基礎，為疾病防治尋找新干預靶位提供新思路。
　　 方法：通過經(jīng)鼻吸入臨床標準銅綠菌株PAO1建立急性銅綠假單胞菌肺部感染小鼠模型。應用Real-time RT-PCR(Taqman)和ELISA的方法測定Th17細胞免疫模式中的IL-17、IL-22以及IL-

2、23 mRNA和蛋白水平的表達；應用抗IL-17抗體探究IL-17在該感染模型中的作用，以流式細胞儀技術和免疫熒光分析IL-17的來源細胞；應用抗γδTCR抗體耗竭體內(nèi)γδT細胞以探討產(chǎn)IL-17γδT細胞在該急性感染模型中所起的作用。
　　 結(jié)果：
　　 1.在小鼠急性銅綠假單胞菌肺部感染模型中，Th17免疫模式中的效應細胞因子IL-17、IL-22以及相關細胞因子IL-23的mRNA水平均在4小時迅速升高并達到峰值，

3、各細胞因子的蛋白水平則在4小時開始升高，在8小時達到峰值。
　　 2.在中和體內(nèi)IL-17后，由IL-17誘導產(chǎn)生的趨化因子G-CSF、KC、MIP-1α、MIP-2較之IgG對照組明顯下降(P<0.01)，同時該組小鼠肺內(nèi)的炎癥細胞由中性粒細胞為主轉(zhuǎn)變?yōu)榱馨图毎麨橹?，且炎癥程度較之對照組嚴重(P=0.01)該組小鼠肺內(nèi)細菌負荷量在感染8小時后是對照組的十倍，在感染后16小時后是對照組的100倍。
　　 3.在該模型中，

4、Th17細胞和產(chǎn)IL-17的γδT細胞均是肺內(nèi)IL-17的細胞來源，其中產(chǎn)IL-17γδT細胞在CD3+T細胞中所占百分比較Th17細胞更高。
　　 4.在耗竭體內(nèi)γδT細胞后，該模型中的IL-17明顯下降(p<0.01)，同時伴有與IL-17相關的的趨化因子G-CSF、KC、MIP-1α、MIP-2的明顯下降，并最終導致了肺內(nèi)細菌負荷量的明顯增加，其增高幅度與抗IL-17抗體組小鼠相仿。
　　 5.在耗竭體內(nèi)γδT細胞