分泌型免疫球蛋白A-ELISA檢測試劑盒的研制及臨床應用研究.pdf

1、目的:
　　 1.研制酶聯(lián)免疫試劑盒以檢測外分泌液中分泌型免疫球蛋白A含量,并對對分泌型免疫球蛋白A含量ELISA檢測試劑盒進行性能驗證；2.應用試劑盒對個人生活方式、環(huán)境因素和成年人粘膜免疫的關系進行初步研究；3.應用試劑盒對習慣性活動量與sIgA的相關性進行初步研究。
　　 方法:
　　 1.采用2種不同結合位點的抗體,抗SC抗體用于包被微孔板,另一種用于標記HRP,優(yōu)化反應條件和篩選試劑,建立雙抗體夾心EL

2、ISA檢測方法,配合底物組裝試劑盒；對分泌型免疫球蛋白含量ELISA檢測試劑盒進行精密度、準確度、靈敏度、穩(wěn)定性驗證及干擾試驗。
　　 2.對工作環(huán)境相似的30位男性和33位女性,使用標準問卷調(diào)查個人的生活方式、口腔衛(wèi)生、所處環(huán)境中空氣污染的狀況、心理因素、上呼吸道感染的頻率及持續(xù)時間。通過吐唾沫法采集靜息狀態(tài)下的混合唾液,用于測定唾液體積、唾液分泌率、sIgA濃度、sIgA分泌率。
　　 3.對63位成年人、58位大學

3、生和73位小學生通過問卷的方式進行習慣活動量的調(diào)查,通過吐唾沫法采集靜息狀態(tài)下的混合唾液,用于測定唾液體積、唾液分泌率、sIgA濃度、sIgA分泌率。
　　 結果:
　　 1.sIgA標準品的對數(shù)和相應吸光度的對數(shù)在6.25～600ng/ml范圍內(nèi)呈線性關系；該試劑盒檢測限可達4.915 ng/ml,定量限可達6.25ng/ml,靈敏度符合要求；檢測低、中、高3個濃度的sIgA樣品,實驗內(nèi)的變異系數(shù)分別是5.12％、4.

4、60％、5.48％,試驗間的變異系數(shù)分別是8.39％、6.80％、7.36％；回收試驗的回收率為95.93％-105.85％,準確度符合要求;樣品基質(zhì)無明顯干擾。
　　 2.男性的唾液體積、唾液分泌率和sIgA分泌率高于女性,P值分別為0.023、0.023和0.033；口腔清潔分數(shù)≧6組的slgA分泌率高于分數(shù)<6組,P值為0.05；抑郁組URTI發(fā)病率及癥狀持續(xù)時間高于正常組,P值分別為0.035和0.016；飲食葷素均衡組

5、的唾液sIgA含量、sIgA分泌率明顯高于非均衡組,P值為別0.02和0.0001；多元逐步線性回歸顯示,sIgA分泌率與唾液體積、sIgA、飲食習慣、休閑運動量和總運動量相關。
　　 3.成年組男性唾液體積、唾液分泌率和sIgA分泌率高于女性組,P值分別為0.023、0.023和0.033；男性的工作HPA、運動HPA和總HPA均明顯高于女性,P值分別為0.0004、0.0008及0.0001。大學生組男性運動HPA和總HPA

6、高于女性,P值為0.0016和0.0176。小學生組女生sIgA高于男生,P值為0.03。大學生組和小學生組的sIgA含量和sIgA分泌率明顯高于成年組；成年組的工作活動量高于另外兩組,三個組的體育運動量均有顯著差別,小學生組的空閑活動量和總活動量明顯高于成年組和大學生組。
　　 結論:
　　 1.該試劑盒具有較好的精密度、準確度、特異性及穩(wěn)定性,可用于外分泌液中sIgA含量的測定。
　　 2.被動吸煙和室內(nèi)空氣