老龍皮的藥效物質及質量標準研究.pdf

1、目的：通過對老龍皮LobariakurokauaeYoshim.的藥效活性部位和化學成分的試驗研究，尋找老龍皮的質控指標并制定其質量標準，為綜合評價老龍皮的質量及其合理開發(fā)利用提供科學依據。
　　 方法：將老龍皮藥材分別用水和乙醇提取進行藥理學研究，藥效學試驗采用二甲苯致小鼠耳腫脹模型和棉球肉芽腫模型對兩個部位進行抗炎活性篩選、采用試管二倍稀釋法和紙片法對兩個部位進行體外抑菌活性篩選、采用DPPH清除試驗和還原Fe3+能力測試法

2、進行體外抗氧化活性篩選，并對其進行進行急性毒性試驗研究。
　　 在藥效活性篩選試驗基礎上，確定老龍皮乙醇提取物為主要有效部位。采用石油醚、乙酸乙酯、正丁醇依次對老龍皮80％乙醇提取物進行萃取，硅膠柱層析法對各萃取部位進行化學成分分離純化研究。
　　 以《中國藥典》(2010年版一部)為主要依據，采用生藥學鑒定和薄層色譜法對老龍皮進行鑒別項研究；采用水分測定法、灰分測定法、原子吸收分光光度法法進行檢查項研究；采用乙醇熱浸法

3、進行浸出物含量研究；采用高效液相色譜法對老龍皮中主要成分進行網脊衣酸A含量測定方法研究。
　　 結果：與陰性對照組比較，老龍皮乙醇提取物高劑量組(40g生藥/kg)對二甲苯致小鼠耳腫脹有抑制作用(P<0.05)，抑制率為45.38％，老龍皮乙醇提取物低劑量組(10g生藥/kg)對棉球誘發(fā)小鼠肉芽組織增生有顯著抑制作用(P<0.01)，抑制率為26.28％。體外抑菌試驗結果表明老龍皮乙醇提取物和水提取物均有一定的抑菌作用，敏感菌為

4、大腸桿菌和白色念珠球菌，乙醇提取物作用較水提取物強，二者的殺菌能力均較弱。體外抗氧化試驗結果表明老龍皮乙醇提取物對DPPH的清除率和對Fe3+的還原能力均優(yōu)于老龍皮水提取物。老龍皮水提取物的小鼠最大耐受量為148g生藥/kg，相當于人一日用量的592倍，老龍皮乙醇提取物的小鼠最大耐受量為196g生藥/kg，相當于人一日用量的784倍。
　　 硅膠柱層析法分離純化得到7個化合物，綜合運用1H-NMR、13C-NMR和MS等鑒定其結

5、構為：十六烷酸(palmitinicacid)、Stictan-3β，22α-diol、齊墩果酸(oleanolicacid)、熊果酸(ursolicacid)、金色酰胺醇酯(aurantiamideacetate)、網脊衣酸A(retigericacidA)、網脊衣酸B(retigericacidB)。其中齊墩果酸、熊果酸和金色酰胺醇酯為首次從老龍皮中分得。
　　 確定以網脊衣酸A和網脊衣酸B對照品為對照、甲苯-乙酸乙酯-甲酸

6、為展開劑的薄層色譜鑒別；確定檢查項下水分不得過12.0％、總灰分不得過14.0％、酸不溶性灰分不得過8.0％、鉛不得過百萬分之二十五、鎘不得過千萬分之三、銅不得過百萬分之十二、砷不得過百萬分之二、汞不得過千萬分之六；確定80％乙醇熱浸法浸出物不得低于6.0％；確定老龍皮中網脊衣酸A的含量不得低于0.43％。
　　 結論：老龍皮有抗炎、體外抑菌和體外抗氧化作用，其主要活性部位為乙醇提取部位。通過研究對其化學成分有了進一步的了解，初