肝素的提取精制和亞硝酸法制備低分子肝素的研究.pdf

1、跨西料技大學論文題目：肝素的提取精制和亞硝酸法制備低分子肝素的研究學科門類：工學一級學科：食品科學與工程培養(yǎng)單位：食品與生物工程學院碩士生：黃滿紅導師：宋宏新教授2016年5月肝素的提取精制和亞硝酸法制備低分子肝素的研究摘要肝素是一種由動物結締組織的肥大細胞產生的粘多糖，主要存在于豬小腸粘膜和肝、肺臟等組織細胞中。目前，我國主要以肉制品企業(yè)的副產物豬小腸粘膜提取肝素，大多小企業(yè)技術設備落后，缺乏專業(yè)技術人員，肝素產品良莠不齊，多以粗品肝

2、素的原料藥出口為主，提高產品質量和加工精度，延長產業(yè)鏈提質增效已迫在眉睫。肝素有很好的抗凝血作用，它是預防和治療深靜脈血栓形成(DVT)等血栓栓塞性疾病的首選藥物。肝素作為抗凝劑臨床應用已有70多年，但由于其容易引起出血的副作用而限制其臨床應用。而低分子肝素相比肝素有許多優(yōu)點，比如：在低水平抗凝作用時可以產生良好而持久的抗血栓作用、出血副作用小、血漿半衰期長等。但是我國目前對低分子肝素的研究仍處于初級階段，低分子肝素的使用主要依靠進口。

3、因此本課題對肝素鈉的制備技術進行研究，旨在改善傳統(tǒng)生產工藝，提高肝素產品質量。同時研究亞硝酸法制備低分子肝素的工藝參數(shù)，為低分子肝素的生產提供一定的理論依據(jù)。主要研究結果如下：1肝素鈉效價的檢測研究。通過羊血漿法、生色底物法和天青A法測定了兩廠家的肝素鈉效價分別為：148U／mg和164U／mg，1455U／mg和1568U／mg，1455U／mg和1614U／mg。三種方法都能用于測定肝素鈉效價，且測定結果可靠，基本一致。在應用中應結

4、合實際條件和各方法的優(yōu)缺點進行選擇。天青A法用于試驗快速測定，另外兩種方法基于抗凝活性的檢測主要用于終產品藥效檢測。2粗品肝素鈉的制備研究。以肝素鈉效價、吸附率和肝素得率為評價指標，研究了肝素鈉制備的酶解、樹脂的吸附和解吸三個關鍵步驟，分別考察了溫度，pH值、鹽濃度、時間等對于提取工藝的影響，在單因素試驗基礎上通過正交試驗取得粗品肝素鈉制備的最佳條件是：a、酶解：小腸粘膜與提取液的料液比1：8，鹽濃度05mol／L，胰蛋白酶添加量01％

5、，酶解液pH值為88，酶解溫度60℃，酶解時間35小時。b、吸附：D254樹脂添加量28％、吸附溫度55℃，鹽濃度02mol／L，吸附液pH值85、吸附時間7小時。c、洗脫：洗脫液鹽濃度30mol／L、洗脫液pH值85、洗脫溫度45℃、洗脫時間35小時，洗脫2次。以此方法制備得到的粗品肝素鈉效價為83U／mg，得率212％，蛋白質含量1926mg／g，產品色澤為淡黃色。達到了最終精制肝素鈉對原料的要求，并且產量穩(wěn)定高效，取得了滿意的效果