酶法催化制備富含EPA和DHA甘油三酯研究.pdf

1、EPA和DHA主要以甘油三酯的形式存在于魚油中，目前市場上的魚油甘油三酯產品中EPA和DHA含量較低，分別為18 wt％、12 wt%。因此，需要通過一定的工藝來提高兩者的含量。本文利用酶法制備EPA和DHA總含量45 wt%以上的高純度甘油三酯型魚油，擬為富含EPA和DHA的甘油三酯型魚油的工業(yè)化生產提供科學依據。主要研究內容如下：
　?。?）以精煉深海魚油為原料，篩選出一種能高效催化魚油水解富集EPA和DHA的脂肪酶Amano

2、 AY“Amano”400SD，利用Amano AY“Amano”400SD為催化劑，將天然魚油部分水解，對EPA和DHA進行富集，通過對酶添加量、pH值、水油質量比、反應溫度、反應時間進行探討，得到的優(yōu)化條件為，脂肪酶添加量為底物質量的0.2‰，反應溫度35℃，緩沖溶液pH值6，水油比1：1，反應時間10 h，恒溫震蕩器轉速200 r/min?？疾炝苏麴s溫度對于分子蒸餾分離魚油脂肪酸和甘油酯混合物的影響，確定了最佳的分子蒸餾溫度為16

3、0℃，經過二級分子蒸餾純化分離甘油酯和脂肪酸，收集到的重相為富含EPA和DHA的甘油酯產品，甘油三酯含量為70.7%，甘油二酯含量為28.3%，單酯含量為0.85%，FFA為0.15%，酸值為0.92 mg KOH/g，甘油酯中EPA和DHA由最初的19.3 wt%、13.0 wt%上升到了25.3 wt%、21.6 wt%，EPA回收率68.6%，DHA回收率87.2%。分子蒸餾同時實現了對水解副產物的回收。
　?。?）用水解反

4、應得到的甘油酯與濃縮魚油乙酯在真空條件下通過酶催化酯交換反應合成甘油三酯，得到的優(yōu)化工藝為，濃縮魚油羥基與混合甘油酯游離羥基為1：1，固定化脂肪酶Lipozyme435添加量為底物質量的2%，反應溫度60℃，反應6 h，反應絕對壓力20 Pa，磁力攪拌轉速1000 r/min。在此條件下進行酯交換反應，產物經分子蒸餾后甘油酯中甘油三酯的含量可以達到97.6%，甘油酯中EPA和DHA的含量分別為28.2 wt%、21.4 wt%。

5、　　（3）用尿素包合法富集水解副產物脂肪酸中的EPA和DHA，得到的優(yōu)化條件為：尿素/脂肪酸的比例為2.5：1，醇脲比3：1，包合溫度5℃，包合1.5 h，EPA含量從11.4 wt%增到47.8 wt%，DHA含量從2.10 wt%增到11.9 wt%，EPA回收率達70.3%，DHA回收率達90.4%。將富集后的高純度EPA和DHA脂肪酸產物乙酯化后與水解混合甘油酯反應，產物甘油酯中甘油三酯的含量為95.9%，甘油酯中EPA和DHA