過氧化物酶增殖物激活受體γ和固醇調節(jié)元件結合蛋白-lc在非灑精性脂肪肝大鼠肝組織中的表達及意義.pdf

1、目的：
　　 觀察過氧化物酶增殖物激活受體γ(PPARγ)和固醇調節(jié)元件結合蛋白-1c(SREBP-1c)在大鼠非酒精性脂肪性肝病(NAFLD)中的表達變化,以探討二者在NAFLD形成過程中的相互作用及可能機制。
　　 方法：
　　 40只SD大鼠隨機分為對照組和實驗組。實驗組予以40％CCL4皮下注射每周2次和高脂飼料復合喂食以獲得NAFLD大鼠模型,運用酶法分析各組在2、4、6、8周4個時間點血清谷丙轉氨酶(

2、ALT)、谷草轉氨酶(AST)、甘油三酯(TG)、總膽固醇(TC)的水平、ELISA方法檢測各觀察點腫瘤壞死因子(TNF-α)水平,用免疫組化方法及RT-PCR方法分析肝組織PPARγ和SREBP-1c的表達情況。
　　 結果：
　　 1、隨著造模時間延長,實驗組大鼠肝臟脂肪變越來越明顯,血清ALT、AST、TG、TC逐漸升高,與對照組比較差異有統(tǒng)計學意義(p＜0.05)。
　　 2、在實驗組大鼠肝細胞中TNF-

3、α從第2周起就開始有較弱表達,隨造模時間延長表達逐漸增強,與對照組相比有顯著性差異(p＜0.05)。
　　 3、免疫組化染色結果顯示,實驗組SREBP-1c早期表達于細胞質中,第2周末即可見棕黃色顆粒此種表達隨造模時間延長而增強,并強于對照組(p＜0.05),至第8周末細胞質中可見大量棕褐色顆粒沉積,同時大部分細胞核也呈陽性著色(p＜0.05)。而實驗組PPARγ在4周末表達方開始增強,肝細胞質中棕黃色顆粒增多。隨著肝細胞脂肪變

4、性程度加重,PPARγ表達增強,第8周末細胞質中可見大量棕褐色顆粒沉積(p＜0.05)。
　　 5、RT-PCR檢測到2周末實驗組大鼠肝組織SREBP-1c mRNA轉錄開始增多,隨著造模時間延長而增強,與對照組相比差異有統(tǒng)計學意義(P＜0.01)。而RT-PCR檢測大鼠肝臟PPARγ的表達情況發(fā)現:實驗組各組間PPARγ mRNA從4周開始表達增加,此時mRNA轉錄與對照組比較明顯增多,隨脂肪肝程度的加重逐漸增強,與對照組相比

5、差異有統(tǒng)計學意義(P＜0.05)。
　　 6、隨著脂肪肝造模時間延長,炎癥壞死逐漸明顯,肝損害逐漸加重。實驗組大鼠ALT、AST、TG及TC逐漸升高,血清TNF-α亦呈上升趨勢。統(tǒng)計相關分析顯示血清TNF-α與ALT、AST、TG、TC呈正相關,相關系數分別為0.782、P＜0.05;0.863、P＜0.05;0.356、P＜0.05;0.786、P＜0.05。相關性分析RT-PCR結果發(fā)現SREBP-1c、PPAR.γ呈正相關

6、關系,相關系數r=0.951,P＜0.05。進一步分析SREBP-1c、PPARγ的RT-PCR.結果與血清TNF-α結果亦呈正相關,TNF-α與SREBP-1c、PPARγ相關系數分別為0.922、0.903(P＜0.05)。
　　 結論：
　　 1、PPARγ和SREBP-1c、TNF-α可作為敏感的指標反映非酒精性脂肪肝的發(fā)生及發(fā)展情況。
　　 2、PPARγ和SREBP-1c與肝細胞病變程度有很好的一致性