祛膜止崩乳膏治療子宮內膜增生及安全性研究.pdf

1、目的：采用雌激素負荷法即隔日肌肉注射苯甲酸雌二醇，建立子宮內膜增生模型，觀察祛膜止崩乳膏對雌激素致大鼠、家兔子宮內膜增生癥的祛膜效果和之后的修復情況，并對祛膜止崩乳膏的毒性及其使用過程中的安全性進行探討研究。
　　 方法：(1)以不同的劑量隔日肌肉注射苯甲酸雌二醇建立大鼠、家兔子宮內膜增生模型，待模型成功后，麻醉，開腹，單側子宮內給予不同劑量的祛膜止崩乳膏，在給藥后的不同時間點觀察該藥對大鼠、家兔子宮內膜增生癥的祛膜效果和之后的

2、修復情況，以及對大鼠卵巢、宮頸、陰道的組織病理學影響，并與右側子宮做自身比較；(2)觀察小鼠灌胃高濃度的祛膜止崩乳膏所產生的急性毒性反應，測定LD50或最大給藥量，試驗結束后取小鼠心、肝、脾、肺、腎及消化道進行組織病理學檢查，分析藥物毒性作用可能的靶器官和人誤服過量藥物時可能出現(xiàn)的急性中毒癥狀；(3)安全性研究：①豚鼠在重復接觸祛膜止崩乳膏后，觀察祛膜止崩乳膏作為致敏原引起的變態(tài)反應在皮膚上的表現(xiàn)，按皮膚過敏反應評分標準評分，計算各組的

3、反應平均值和致敏率，判定致敏反應強度；②家兔進行陰道給藥觀察祛膜止崩乳膏對家兔陰道粘膜的刺激性，按局部粘膜刺激反應分級標準進行分級評分；③祛膜止崩乳膏家兔皮膚給藥對完整皮膚和破損皮膚的刺激性作用，觀察給藥后1、24、48、72小時出現(xiàn)的紅斑和水腫等情況，進行評分和評價皮膚刺激強度，實驗結束后取給藥部位皮膚進行組織病理學檢查；④取正常的雌性大鼠分組，麻醉后開腹單側子宮內給藥，于給藥后不同時間點分別處理部分動物，取其雙側卵巢、子宮、宮頸及陰

4、道，進行病理學檢查，觀察祛膜止崩乳膏對大鼠正常子宮內膜組織病理學檢查的影響；⑤將祛膜止崩乳膏局部涂抹在小鼠耳殼，20min后處死動物，精密稱量左右耳殼重量，計算腫脹度。
　　 結果：(1)祛膜止崩乳膏子宮內給藥對雌激素致子宮內膜增生癥大鼠能使上皮細胞層脫落，內膜變薄，并有廣泛的急性炎癥反應，給藥側子宮重量大于未給藥側，此作用在給藥3天表現(xiàn)最突出，并呈濃度依賴性，藥后7天后逐漸恢復，上皮細胞修復，呈新生的柱狀上皮，炎性反應逐漸減輕

5、，給藥21天后內膜恢復，但有些上皮仍呈復層。祛膜止崩乳膏對子宮內膜增生癥大鼠宮頸、陰道和卵巢組織無顯著影響；祛膜止崩乳膏子宮內給藥對雌激素致子宮內膜增生癥家兔能使上皮細胞層脫落，內膜變薄，并有廣泛的急性炎癥反應，此作用在給藥3天表現(xiàn)最突出，并呈濃度依賴性。(2)祛膜止崩乳膏小鼠灌胃給藥具有嚴重的急性毒性反應，表現(xiàn)為自主活動減少，蜷縮，給藥40min后排尿增多，呼吸急促困難，肌肉顫抖，無力，對心、肝、脾、肺、腎等組織有嚴重的病理學損傷，小

6、鼠灌胃祛膜止崩乳膏40、32、25g/kg的死亡率分別為100％、50％和20％，祛膜止崩乳膏小鼠灌胃的LD50為30.20g/kg，95％可信限區(qū)間為33.05～27.59g/kg。(3)安全性試驗：①祛膜止崩乳膏低濃度(臨床擬用制劑)無致敏性，高濃度能引起致敏接觸反應，致敏率為20％；②祛膜止崩乳膏低濃度(臨床擬用制劑)組及高濃度組有對家兔陰道粘膜均為中度刺激性，平均刺激性反應分值分別為1.75及2.5與對照組比較差異有顯著性意義；

7、③祛膜止崩乳膏高、低濃度組(臨床擬用制劑)對家兔完整皮膚和破損皮膚具有刺激性，能引起紅斑和水腫，在1小時～24小時較嚴重，72小時外觀上減輕，皮膚組織病理學檢查結果表明，祛膜止崩乳膏高、低濃度組家兔在給藥72小時后，完整皮膚鏡下可見不同程度的小灶性缺損、壞死或脫落，炎細胞浸潤，破損皮膚病理改變更明顯一些；④祛膜止崩乳膏高濃度組可使正常大鼠給藥側子宮內膜上皮細胞呈低柱狀，腺體數(shù)量較少，少數(shù)動物內膜上皮細胞部分脫落，少量炎細胞浸潤，與未給藥

8、的對側子宮有顯著性差異；中濃度組給藥側內膜上皮細胞有少數(shù)脫落，上皮細胞呈低柱狀，而對側上皮高柱狀，幾乎無脫落；低濃度組給藥側上皮部分脫落，腺體正常，與對側子宮無明顯差別；⑤祛膜止崩乳膏組小鼠耳殼腫脹度均大于對照組，祛膜止崩乳膏中、高濃度組與對照組比較，有顯著性差異(P＜0.01)，但弱于二甲苯組。
　　 結論：祛膜止崩乳膏(臨床擬用制劑)子宮內給藥對雌激素致子宮內膜增生癥大鼠、家兔有祛除內膜作用，對正常大鼠子宮內膜也有祛膜作用；