AcSDKP抗大鼠肝纖維化的實驗研究.pdf

1、目的：N-乙?；?絲氨酰-天門冬酰-賴氨酰-脯氨酸(N-acetyl-Seryl -aspartyl-lysyl –proline，AcSDKP)可抑制心臟和腎臟纖維化。本研究通過觀察AcSDKP對活化肝星狀細胞(hepatic stellate cell，HSC)與大鼠四氯化碳(carbon tetrachloride，CCl4)肝纖維化模型的影響，評價其抗肝纖維化作用，并為進一步研究AcSDKP在血管緊張素轉(zhuǎn)換酶抑制劑(angiot

2、ensin- converting enzyme inhibitor，ACEI)抗肝纖維化中的作用提供理論基礎(chǔ)。 方法：原代分離培養(yǎng)大鼠HSC活化后，分別給予0.01～100 nmol/L AcSDKP進行干預，觀察AcSDKP對活化HSC的增殖、合成和分泌細胞外基質(zhì)(extracellular matrix，ECM)的影響；活化HSC分別在給予AcSDKP或轉(zhuǎn)化生長因子-β1（transforming growth facto

3、rβ1，TGF-β1）干預后，觀察AcSDKP對TGF-β1介導活化HSC合成和分泌ECM的影響；建立CCl4誘導的大鼠肝纖維化模型，通過皮下植入微泵持續(xù)給予AcSDKP干預5周，檢測肝功能、病理組織學、HSC活化、ECM合成與降解等指標，觀察AcSDKP對大鼠肝纖維化的治療效果。 結(jié)果：與空白對照組相比，1、10 nmol/L　AcSDKP顯著抑制活化HSC的增殖（P<0.05）；1、10 nmol/L和0.1～100 nmo

4、l/L AcSDKP分顯著抑制HSCⅠ型膠原(collagen Ⅰ，ColⅠ)、Ⅲ型膠原(collagen Ⅲ，Col Ⅲ)mRNA表達（P<0.05）；0.1～10nmol/L和0.1、1nmol/L可分別顯著抑制透明質(zhì)酸(hyaluronic acid，HA)、層粘連蛋白(laminin，LN)的表達（P<0.05）。無論是否有TGF-β1干預，AcSDKP（1nmol/L)均下調(diào)ColⅠmRNA、HA和α-平滑肌蛋白(α-smoo

5、th muscle acin，α-SMA）表達（P<0.05）。 AcSDKP組的大鼠Ⅲ型前膠原(procollagen III ，PCⅢ)、LN和羥脯氨酸（hydroxyproline，Hyp）含量較模型組均明顯下降（P<0.05）；肝功能明顯好轉(zhuǎn)（P<0.05）。與模型組相比，AcSDKP組大鼠肝組織膠原面積、α-SMA、TGF-β1、增殖細胞核抗原（proliferating cell nuclear antigen，PC

6、NA）蛋白和ColⅠ、Col Ⅲ、金屬蛋白酶組織抑制物-1、2（tissue inhibitor of metalloproteinase-1、2，TIMP-1、2)mRNA表達表達顯著下降（P<0.05），基質(zhì)金屬蛋白酶-2（matrix metalloproteinases-2，MMP-2）表達顯著上調(diào)（P<0.05）。 結(jié)論：①AcSDKP抑制活化HSC合成和分泌ECM，其機制可能是抑制HSC增殖，使合成和分泌ECM的HS