實驗性大鼠肝纖維化自發(fā)逆轉(zhuǎn)研究.pdf

1、目的:在肝纖維化過程中,轉(zhuǎn)化生長因子-β1(TGF-β1)和組織金屬蛋白酶抑制因子-1 (TIMP-1)對肝纖維化的形成均發(fā)揮重要的促進作用,TGF-β1可促進Ⅰ、Ⅲ型膠原合成,使細胞外基質(zhì)(ECM)沉積增加,TIMP-1則通過特異性結(jié)合組織金屬蛋白酶(MMPs),抑制MMPs的活性,從而減少ECM的降解.該實驗旨在研究CCI<,4>誘導的肝纖維化大鼠在去除誘導因素后,肝纖維化自發(fā)逆轉(zhuǎn)過程中肝臟的病理學改變,以及TGF-β1和TIMP-

2、1表達的動態(tài)變化及組織分布,以探討其在肝纖維化自發(fā)逆轉(zhuǎn)過程中所發(fā)揮的作用.材料與方法:30只雄性SD大鼠被隨機分為5組,每組6只.其中1組作為正常對照組(N組),另外4組建立大鼠肝纖維化模型,給予40﹪CCl<,4>(橄欖油配制)皮下注射,劑量為每次0.3ml/100g體重,每周3次,共計12周.經(jīng)病理組織學證實已形成肝纖維化后停止注射,隨機處死6只大鼠,定為肝纖維化組(F組),以后分別于停止注射后第7、20、30天各隨機處死6只大鼠,

3、分別定為不同時間肝纖維化逆轉(zhuǎn)組(T1、T2、T3組),N組與T3組同時處死.各組大鼠肝臟組織標本部分經(jīng)3﹪戊二醛固定后石蠟包埋切片,HE染色后觀察各組肝纖維化程度,根據(jù)1997年世界肝臟病學會通過的肝纖維化分級標準進行分級,免疫組化(SABC方法)和圖像分析測定肝組織中TIMP-1和TGF-β1的表達與定位.部分肝組織抽提RNA,逆轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈反應技術(shù)(RT-PCR)檢測TIMP-1和TGF-β1的mRNA的動態(tài)表達.結(jié)論:在肝纖維化自