食用蘋果輔助逆轉(zhuǎn)大鼠肝纖維化的實驗性研究.pdf

1、目的：研究蘋果對實驗性肝纖維化大鼠的輔助逆轉(zhuǎn)作用，并探討其對肝纖維化的影響機制。
　　方法：雄性SD大鼠42只分為正常組、CCL4肝纖維化模型組、自然恢復(fù)組、丹芍化纖治療組、丹芍化纖+蘋果試驗組。除正常組以外，其余大鼠均采用CCL4[皮下注射40％CCL4+花生油溶液混合液(1∶4)0.3ml/100g(首次用純CCL40.5ml/100g)，2次/周]、飲酒（隔日以30％乙醇為飲料）、高脂低蛋白飲食（79.5％玉米粉，20％豬油

2、，0.5％膽固醇）等復(fù)合因素刺激制備大鼠肝纖維化模型共8周。8周末隨機處死模型組大鼠8只，確認(rèn)造模成功后再將剩余模型組大鼠隨機分為丹芍化纖+蘋果試驗組（給予丹芍化纖粉末加蒸餾水混合溶液:藥物濃度為0.1g/100g大鼠體重配比，以0.2ml/10g/d灌胃一次，新鮮蘋果切碎組織勻漿機勻漿后過濾取汁為4ml/100g大鼠體重灌胃，同時蘋果渣做飼料喂養(yǎng)大鼠），丹芍化纖治療組（丹芍化纖粉末加蒸餾水混合溶液:藥物濃度為0.1g/100g大鼠體重

3、配比，以0.2ml/10g/d灌胃一次）及自然恢復(fù)組（給予生理鹽水等量灌胃），共觀察8周。實驗結(jié)束后測定肝臟指數(shù)、血清丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶(alanine amino transferase，ALT)及門冬氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶(aspartate aminotransferase，AST)，RT-PCR檢測肝臟核因子相關(guān)因子-2(NF-E2-related factor2，Nrf-2)、血紅素加氧-1(Heme oxygenase-1，HO-1)

4、、轉(zhuǎn)化生長因子β1(Transfer growth factor-β1，TGF-β1)、基質(zhì)金屬蛋白酶(Matrix metalloproteinase-2，MMP-2)的表達(dá)。肝組織勻漿測丙二醛(MDA)，還原型谷胱甘肽(GSH)的含量;光鏡下觀察肝組織纖維化程度，免疫組化SP法檢測肝臟中COL-Ⅰ，TIMP-1的表達(dá)。
　　結(jié)果：丹芍化纖+蘋果試驗組與模型組、自然恢復(fù)組及丹芍化纖治療組比較:肝臟指數(shù)、血清ALT及AST顯著下降

5、(P＜0.05，P＜0.01，P＜0.01); RT-PCR中Nrf-2mRNA及HO-1 mRNA在丹芍化纖+蘋果試驗組中的表達(dá)較丹芍化纖治療組與模型組、自然恢復(fù)組升高(P＜0.05)，丹芍化纖+蘋果試驗組中肝組織TGF-β1的表達(dá)較丹芍化纖治療組與模型組、自然恢復(fù)組降低(P＜0.05)、而MMP-2在丹芍化纖+蘋果試驗組中的表達(dá)較丹芍化纖治療組與模型組、自然恢復(fù)組升高(P＜0.05);GSH有所升高，MDA有所降低，差異有顯著性(P

6、＜0.05)。免疫組化中丹芍化纖+蘋果試驗組肝組織的Ⅰ型膠原(collagen-Ⅰ，COL-Ⅰ)，基質(zhì)金屬蛋白酶組織抑制因子1(tissue inhi-bitor of metaloproteinase-1，TIMP-1)的表達(dá)與模型組、自然恢復(fù)組、丹芍化纖治療組比較則顯著降低(P＜0.01，P＜0.05)。
　　結(jié)論：蘋果在實驗性肝纖維化大鼠的逆轉(zhuǎn)過程中起到了有效的輔助作用，輔助逆轉(zhuǎn)的機制可能與其上調(diào)Nrf-2表達(dá)，從而增強HO