西羅莫司對人胰腺癌SW1990細(xì)胞增殖及mTOR、HIF-1α、VEGF基因抑制作用的研究.pdf

1、目的：西羅莫司是一種哺乳動物雷帕霉素靶蛋白的特異性抑制劑，新近研究發(fā)現(xiàn)它具有良好的抗腫瘤作用，但其作用機(jī)制尚未完全闡明，本實(shí)驗(yàn)通過研究西羅莫司對體外培養(yǎng)的人胰腺癌細(xì)胞系SW1990增殖及mTOR、HIF-1α、VEGF基因的抑制作用，探討以mTOR為靶點(diǎn)治療胰腺癌可能的細(xì)胞內(nèi)信號傳導(dǎo)機(jī)制。
　　 方法：缺氧條件下體外培養(yǎng)胰腺癌SW1990細(xì)胞，外源性給予不同濃度的西羅莫司(0.01 nmol/L-100000 nmol/L)刺激

2、細(xì)胞24h，MTT法檢測不同濃度藥物對胰腺癌細(xì)胞增殖的影響。半定量RT-PCR檢測西羅莫司對SW1990細(xì)胞mTOR、HIF-1α和VEGF mRNA表達(dá)的影響。Western blot檢測不同濃度的藥物刺激后SW1990細(xì)胞內(nèi)mTOR、HIF-1α和VEGF蛋白表達(dá)的變化。
　　 結(jié)果：西羅莫司可顯著抑制胰腺癌細(xì)胞SW1990的增殖，其抑制率隨藥物濃度的增加而上升。隨著西羅莫司作用濃度的增加，SW1990細(xì)胞中mTOR和VEG

3、F mRNA的表達(dá)水平呈明顯下降趨勢，實(shí)驗(yàn)組與對照組比較，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）；而西羅莫司濃度的高低對HIF-1αmRNA的表達(dá)量并無明顯的影響。西羅莫司能明顯的抑制SW1990細(xì)胞mTOR、HIF-1α、VEGF蛋白的表達(dá)，在其濃度最大組抑制效應(yīng)達(dá)到最大。
　　 結(jié)論：在缺氧條件下，西羅莫司可通過mTOR信號轉(zhuǎn)導(dǎo)途徑下調(diào)胰腺癌SW1990細(xì)胞內(nèi)HIF-1α蛋白表達(dá)，進(jìn)而抑制VEGF基因的轉(zhuǎn)錄，誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡，這可能是