攜帶mda-7基因的腺病毒聯合達卡吧嗪對人黑素瘤裸鼠移植瘤生長抑制作用的實驗研究.pdf

1、目的:聯合應用攜帶mda-7基因的腺病毒Ad.mda-7與DTIC,觀察其對人A375黑素瘤裸鼠移植瘤的治療效果,為臨床治療黑素瘤奠定實驗基礎。
　　 方法:建立裸鼠黑素瘤移植瘤模型,隨機分為4組,每組8只,分別給予PBS、Ad.mda-7單獨治療、DTIC單獨治療、Ad.mda-7聯合DTIC治療。病毒注射后第7天每組隨機處死4只動物,RT-PCR法檢測MDA-7 mKNA表達,免疫印跡法檢測MDA-7蛋白表達情況,TUNEL

2、法檢測腫瘤組織凋亡,免疫組化法檢測BAX、Bcl-2、VEGF蛋白表達。余動物繼續(xù)測量腫瘤體積繪制腫瘤生長抑制曲線,在治療第30天時處死動物,稱量移植瘤瘤重。
　　 結果:RT-PCR法與免疫印跡法顯示Ad.mda-7單用或與DTIC聯合應用都可使腫瘤組織表達MDA-7 mRNA和MDA-7蛋白,兩治療組之間沒有統計學差異,DTIC不影響MDA-7蛋白的轉錄和翻譯:TUNEL檢測顯示聯合治療組的凋亡指數明顯高于各單獨應用組(P＜

3、0.05)和PBS組(PO＜0.05);免疫組化顯示Ad.mda-7與DTIC都可以上調BAX的表達、下調Bcl-2表達,抑制VEGF表達,與單獨應用相比二者聯合應用產生的作用更為顯著(P＜0.05);腫瘤生長曲線顯示Ad.mda-7與DTIC聯合應用具有抑制腫瘤生長的效果,與DTIC單獨應用相比差異有統計學意義(P=0.022);Ad.mda-7組瘤重與DTIC組瘤重均小于PBS組(P＜0.05),聯合治療組瘤重分別小于二者單用組(P