BMP-14與bFGF聯(lián)合誘導骨髓間充質(zhì)干細胞向軟骨分化的實驗研究.pdf_第1頁
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文檔簡介

1、實驗目的： 研究骨形態(tài)發(fā)生蛋白-14(BMP-14)和堿性成纖維細胞因子(bFGF)聯(lián)合誘導大鼠骨髓間充質(zhì)干細胞(BMSCs)向軟骨分化的協(xié)同作用。為軟骨組織工程的種子細胞來源提供一種新的思路。 實驗方法： 采用密度梯度離心法與貼壁分離法相結合分離、純化大鼠BMSCs，用含10％胎牛血清的L-DMEM培養(yǎng)至第三代作為種子細胞，對照組A組不加生長因子，實驗組B、C、D組分別加入100ng/mlBMP-14、10 n

2、g/ml bFGF和100ng/mlBMP-14+10ng/mlbFGF，培養(yǎng)24小時后各組間行細胞增殖比較，14天后終止培養(yǎng)，觀察各組細胞形態(tài)學改變，各組間行Ⅱ型膠原免疫細胞化學染色和阿爾辛藍染色。 實驗結果： 培養(yǎng)24小時后，A、B、C、D四組的吸光度(A)值分別為0.4430±0.0297、0.5480±0.0370、0.6418±0.0534、0.6764±0.0417，除C、D組之間無統(tǒng)計學意義(P>0.05)

3、外，余各組差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05)。培養(yǎng)14天后，A、B、C、D四組的II型膠原細胞染色陽性率分別為7.5210±3.7243％、40.8271±1.2787％、17.2818±1.4242％、60.5114±1.7634％；各組間差異均有統(tǒng)計學意義(P<0.05)。阿爾新藍染色A組為陰性，B、C組呈淡染，D組成藍色。 結論： 細胞因子BMP-14和bFGF的聯(lián)合應用較單個細胞因子可以明顯促進骨髓間充質(zhì)干細胞增殖

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