Endostatin抑制NSCLC增殖及轉移效應的觀察及其機制探討.pdf

1、肺癌的發(fā)病率在全世界范圍逐年上升，亦是死亡率最高的惡性腫瘤之一。非小細胞肺癌(NSCLC)約占肺癌的80％，臨床確診時約有80％的患者已達晚期。在其治療中，化療仍扮演重要角色，但同一方案化療使用>3個周期時，臨床療效多為無變化(SD)或進展(PD)，提示耐藥是肺癌中普遍存在的問題、因而往往導致治療失敗。 20世紀70年代初，Folkman提出了關于腫瘤依賴于血管發(fā)生的假設：早期腫瘤不依賴血管供養(yǎng)，但當瘤塊直徑>1～2mm時，即可

2、分泌各種腫瘤血管發(fā)生因子(Tumor angiogenesis factor FAF)、引起血管內皮細胞增殖、遷移，在瘤塊內形成新的毛細血管、保證腫瘤繼續(xù)生長、特別是向遠方轉移。因此，抑制腫瘤形成新生血管形成可能成為有效的治療手段。目前發(fā)現的抑制血管生長因子主要有：干擾素、白介素12、白介素18、血小板因子4、腫瘤壞死因子、血小板反應素、血管抑制素(Angiostatin)及內皮抑制素(Endostatin)等。其中0‘Reilly等發(fā)

3、現的Endostatin較為理想，它能抑制血管內皮細胞增殖、誘導其凋亡、抑制腫瘤形成新生血管。由于其靶細胞是基因型相對穩(wěn)定的血管內皮細胞，很少發(fā)生變異，Endostatin不易誘發(fā)耐藥。此外，Endostatin與其他化療藥物聯(lián)合應用還具協(xié)同作用。 由于Endostatin為腫瘤治療提供了更廣闊、更有希望的前景，許多國內、外學者嘗試將其用于臨床治療。但迄今為止，對它的研究仍剛剛起步、許多問題懸而未決；主要包括： (1)E

4、ndostatin抗新生血管形成的作用細節(jié)是什么、這種作用能否轉化為活體中的抗腫瘤轉移效果? (2)除血管內皮細胞外，Endostatin對腫瘤細胞有無直接效應? 針對上述問題，進行了相關的細胞和實驗動物體外和體內實驗研究，報告如下： 目的： (1)觀察Endostatin對非小細胞肺癌細胞的直接作用、并與化療藥物順鉑(DDP)的作用進行了比較。 (2)觀察Endostatin對肺癌移植瘤生長及轉

5、移的影響并初步探討其作用機制。 方法： (1)通過動物實驗觀察荷高轉移肺癌細胞之小鼠經Endostatin和化療藥物。DDP作用后瘤體生長情況(抑瘤率)以及原接種及肺轉移之瘤組織中的血管內皮生長因子(VEGF)表達和微血管密度(MVD)、肺轉移發(fā)生數量，并分析各指標間的關聯(lián)性。 (2)通過細胞實驗觀察Endostatin及DDP對人肺癌細胞株Calu-6細胞周期分布的影響與抑制率，并比較各種藥物及各劑量作用間的差

6、別。 結果： (1)動物實驗觀察證實：接種高轉移肺癌細胞之小鼠經Endostatin作用后，抑瘤率DDP組為最高，與其它各組比較差異有顯著性(P<0.05)；400ug組和300ug組次之；200ug+DDP組再次；200ug組抑瘤作用最弱；原接種處之瘤組織中的血管內皮生長因子(VEGF)明顯降低(P<0.05)，微血管密度(MVD)亦降低、但無統(tǒng)計學意義(P>0.05)；肺轉移灶之瘤組織中的VEGF和MVD均明顯降低(

7、P均<0.05)、肺轉移發(fā)生亦同時降低，各觀察指標間具有正相關性。 (2)Endostatin可以直接抑制Calu-6肺癌細胞生長，其抑制作用表現出時間依賴性而并未表現出劑量強度依賴性、且其作用弱于DDP。但并未觀察到Endostatin可以造成Calu-6肺癌細胞增殖周期分布的改變和明顯的凋亡現象。 結論： (1)Endostatin可降低原位移植瘤中的VEGF及轉移瘤中的VEGF和MVD、抑制遠方轉移；

8、 (2)Endostatin可以直接抑制Calu-6肺癌細胞生長，其作用強度有時間依賴性而無明顯劑量依賴性，但不如DDP強烈。 創(chuàng)新點： (1)首次報告Endostatin可直接抑制Calu-6肺癌細胞增殖、抑制活體內的腫瘤生長，其作用強度有時間依賴性而無劑量依賴性。 (2)首次驗證經Endostatin作用后實驗動物的原位移植及轉移瘤中的VEGF、MVD及其與轉移發(fā)生間的關系(即Endostatin對轉移的預