調控OsEBP89基因和OsSSSⅡ-2基因表達對稻米品質影響的研究.pdf

1、水稻是世界上主要的糧食作物之一，目前世上超過一半的人口以稻米為主食。而淀粉是稻米胚乳最主要的成分，決定著稻米的品質。因此，我們可通過調控水稻淀粉合成相關基因的表達，來改良稻米的食昧品質。本研究是利用根癌農桿菌介導的轉基因技術將水稻OsEBP89基因的過表達結構導入品質不同的水稻受體中，探討調控該基因的表達對水稻品質改良的可能性;另外將OsSSSⅡ-2基因的RNA干擾結構導入到抗條武運粳8號中，目的是為了對其品質進行改良。通過PCR篩選到

2、目的基因陽性且去潮霉素標記的多個轉化子，并對部分純系轉化子進行了表達量分析和稻米品質的測定，結果如下:
　　1.從最初的21個含有OsEBP89基因的過表達結構的抗條武運粳8號來源的獨立轉化子后代，共篩選得到10個含有目的基因且去潮霉素抗性選擇標記基因的獨立轉化子，去潮霉素選擇標記頻率為47.62％;另外從最初的30個含有OsSSSⅡ-2基因的RNA干擾結構的抗條武運粳8號共轉化水稻后代獨立轉化子，共篩選得到9個含有目的基因且去潮

3、霉素抗性選擇標記基因的獨立轉化子，去潮霉素選擇標記頻率為30.00％。
　　2.對部分轉基因水稻胚乳總RNA的Real-time PCR分析結果顯示，轉OsEBP89基因過表達結構的轉基因株系目的基因的表達量均升高，而Wx基因的表達量在抗條武運粳8號和日本晴Wxa近等基因系來源的轉基因水稻中是升高的，而在日本晴Wxb來源的轉基因水稻中是降低的;轉OsSSSⅡ-2基因的RNA干擾結構轉基因株系其目的基因的表達量均降低，并且Wx基因的

4、表達量也都是降低的。
　　3.對部分轉基因植株直鏈淀粉含量的測定結果顯示，抗條武運粳8號和日本晴Wxa近等基因系來源的轉OsEBP89基因過表達結構的株系直鏈淀粉含量有不同程度的升高;而日本晴Wxb來源的轉基因株系直鏈淀粉含量幾乎都極顯著降低;轉OsSSSⅡ-2基因的RNA干擾結構的轉基因株系直鏈淀粉含量都是極顯著降低的。在此基礎上，又進行了膠稠度測定，抗條武運粳8號和日本晴Wxa來源的轉OsEBP89基因過表達結構的株系膠稠度有

5、不同程度降低，說明其米質變硬，而日本晴Wxb來源的轉OsEBP89基因水稻膠稠度都有不同程度升高，說明其米質變軟;而轉OsSSSⅡ-2基因的RNA干擾結構的轉基因株系膠稠度都是極顯著升高，說明其米質變軟。
　　4.對部分轉基因植株做差示掃描量熱分析結果顯示，轉OsEBP89基因過表達結構的轉基因株系其糊化溫度與親本相比大部分是降低的，但變化不明顯，盡管不同來源受體AC呈不一致變化;而轉OsSSSⅡ-2基因的RNA干擾結構的轉基因株

6、系其糊化溫度都是降低的，即稻米變得更容易糊化。
　　5.對部分轉基因植株做淀粉粘滯性譜分析結果顯示，轉OsEBP89基因過表達結構的水稻植株的成熟種子與未轉化對照相比，BDV、SBV和CSV在不同受體中與親本相比變化大部分都不明顯;而轉OsSSSII-2基因RNA干擾結構的轉基因株系其BDV都是升高的，SBV和CSV相對親本都是明顯降低的，說明稻米的食味品質得到了改善。
　　6.對農藝性狀的測定結果表明，轉OsEBP89基因