綠原酸緩解大鼠腸道線粒體氧化損傷.pdf

1、隨著經(jīng)濟發(fā)展、生活方式和膳食結(jié)構(gòu)的巨大變化,代謝綜合征(如高血脂癥、糖尿病、心血管病)的發(fā)生率越來越高,嚴重危害人類健康。線粒體是機體細胞內(nèi)能量代謝和自由基產(chǎn)生的主要場所,一旦代謝過程或自由基增減平衡被破壞,就會危害機體并產(chǎn)生疾病。研究表明線粒體功能障礙是引起慢性代謝疾病重要的病理基礎(chǔ),如糖尿病、衰老、心血管疾病和癌癥等,因此,提高線粒體質(zhì)量,降低線粒體損傷,從而抑制自由基的產(chǎn)生是緩解慢性代謝疾病的重要途徑之一。本文通過體外實驗和體內(nèi)實

2、驗,在大鼠腸道線粒體水平上,探討綠原酸對氧化損傷線粒體的保護作用及可能機制。
　　本文第一部分探討綠原酸在體外對大鼠腸道線粒體氧化損傷的保護作用。
　　方法:不同濃度的 H2O2損傷線粒體,測定線粒體腫脹度、膜電位和 ROS,確定H2O2最適濃度;不同濃度的CHA加入線粒體懸液,測定線粒體腫脹、膜電位和 ROS,確定 CHA最適濃度。試驗分四組:正常組、H2O2組、160μmol/LCHA+H2O2組、160μmol/LCH

3、A組。測定線粒體懸液及上清液中細胞色素C、8-OHdG含量、T-SOD、GSH-Px、T-AOC及復合物I、IV和 V活性。
　　結(jié)果:
　　(1)H2O2的最適濃度為0.5mol/L;
　　(2)CHA的最適濃度為160μmol/L;
　　(3)160μmol/LCHA+H2O2組的線粒體懸液細胞色素C含量比H2O2組顯著增多(P<0.05);
　　(4)160μmol/LCHA+H2O2組中8-OHdG

4、的量比 H2O2組顯著降低(P<0.05);
　　(5)與 H2O2組比,160μmol/LCHA+H2O2組 T-SOD、GSH-Px活性顯著增強(P<0.05),T-AOC增強且具有極顯著性(P<0.01);
　　(6)與H2O2組比,160μmol/LCHA+H2O2組線粒體復合物I、IV和V活性增加且具有極顯著性差異(P<0.01)。
　　本文第二部分探討綠原酸在體內(nèi)對大鼠腸道線粒體損傷的保護作用。
　　

5、方法:選用32只健康大鼠(180±20)g,隨機分成四組:正常組、TNBS組、CHA組、CHA+TNBS組,每組8只,實驗期四周,TNBS劑量為100mg/Kg,綠原酸每日經(jīng)口灌胃,劑量為60mg/Kg。本部分做了腸道形態(tài)學觀察,組織學評分,測定回、結(jié)腸T-SOD、T-AOC活性,MDA含量,電鏡觀察線粒體結(jié)構(gòu),測定線粒體懸液及上清液細胞色素C含量,8-OHdG含量,T-SOD活性,MDA含量,復合物I、IV和 V活性。
　　結(jié)果

6、:
　　(1) HE染色顯示CHA+TNBS組腸道絨毛結(jié)構(gòu)比TNBS組完整,組織評分圖顯示兩組具有顯著性差異(P<0.05);
　　(2)CHA+TNBS組回、結(jié)腸T-SOD活性、T-AOC能力高于 TNBS組,且 T-SOD活性出現(xiàn)顯著性(P<0.05);與CHA+TNBS組比,MDA含量在TNBS組升高,且有顯著性(P<0.05);
　　(3)TNBS組電鏡圖顯示線粒體膜破裂,脊斷裂或消失,線粒體基質(zhì)減少且模糊不清

7、晰,線粒體體積變大變圓發(fā)生腫脹,在 CHA+TNBS組損傷癥狀得到緩解;
　　(4)與TNBS組比,CHA+TNBS組線粒體懸液細胞色素C含量增加;
　　(5)CHA+TNBS組復合物 I, IV和 V活性高于 TNBS組,且復合物 I和 V具有顯著性差異(P<0.05)。
　　綜上所述,綠原酸對大鼠腸道線粒體的損傷具有緩解作用。在體外,綠原酸對線粒體復合物I, IV和V具有保護作用;在大鼠體內(nèi),綠原酸對損傷的腸道組織