特異性COX-2抑制劑塞來昔布預防MNNG誘導的大鼠胃癌形成及其機制的實驗研究.pdf

1、該研究分二部分:1、探討特異性COX-2抑制劑Celecoxib和非特異性COX-2抑制劑消炎痛對化學致癌劑MNNG誘導的大鼠胃癌發(fā)生的影響.2、探討特異性COX-2抑制劑Celecoxib預防胃癌發(fā)生的可能作用機制.第一部分目的:探討特異性COX-2抑制劑Celecoxib和非特異性COX-2抑制劑消炎痛對化學致癌劑MNNG(N-甲基-N'-硝基-亞硝基胍,MNNG)誘導的大鼠胃癌發(fā)生的影響.方法:86只二級雄性Wistar大鼠,4周

2、齡,體重40-70克,隨機分為A、B、C、D、E、F共6組.A組(5只):自由飲用蒸餾水不作特殊處理;B組(16只):飲用含MNNG 100μg/ml的蒸餾水;C組(16只)、D組(17只)、E組(16只)和F組(16只)動物除飲用MNNG 100μg/ml的蒸餾水外,C組動物還灌喂消炎痛3mg/kg,1次/日,D組、E組和F組動物分別灌喂Celecoxib 5mg/kg、Celecoxib10mg/kg和Celecoxib 20mg/

3、kg,1次/日;實驗頭6周,B、C、D、E和F組動物每周給予10％氯化鈉1ml灌胃,以提高誘癌率.以上處理連續(xù)10個月.處理因素結(jié)束后2個月處死動物,觀察、比較各組動物大體及組織學變化.結(jié)論:該研究提示特異性COX-2抑制劑Celecoxib對MNNG誘導的大鼠腺胃癌有預防作用,而非特異性COX-2抑制劑消炎痛未見此效果.第二部分目的:探討特異性COX-2抑制劑Celecoxib預防胃癌發(fā)生的作用機制.方法:研究標本來源于第一部分研究動

4、物,乙醚麻醉處死動物,胃沿大彎切開,沿長軸等分為5等份.胃腫瘤組織(T),癌旁組織(NT),處理組中未發(fā)生腫瘤的大鼠胃組織(N)以及正常對照組大鼠胃組織(C)被收集,每組標本分割后分別投入液氮或固定于10%中性福爾馬林,用于檢測下列分子生物學和組織學指標.1.免疫組化方法檢測胃粘膜COX-1、COX-2蛋白的表達;2.Real time PCR法檢測胃粘膜COX-1、COX-2 mRNA的表達;3.PGE2含量的測定采用ELASE法;4

5、.采用HE染色凋亡細胞計數(shù)和TUNEL法檢測胃黏膜上皮細胞凋亡;5.Ki67免疫組化法檢測胃黏膜上皮細胞增殖情況;6.免疫組化和Real time PCR法檢測腫瘤組織血管上皮生長因子VEGF的表達;7.免疫組化和Real time PCR法檢測凋亡相關基因Bcl-2、Bax、Fas表達水平;比較各組動物胃癌組織、癌旁組織、處理組中未見腫瘤的大鼠胃組織以及正常對照組大鼠胃組織上述各項指標的差異.結(jié)論:Celecoxib預防胃癌的作用主要