從睡眠時相和相關遞質水平探討加味逍遙散調治心理應激性失眠的機制.pdf

1、目的：在反復制動建立心理應激大鼠模型工作的基礎上，參考睡眠學指標和神經遞質指標，進一步評定心理應激失眠大鼠動物模型可行性。在此基礎上，評價加味逍遙散調治應激性失眠的療效，并初步探討其作用機制，為臨床治療提供理論依據。 方法：實驗動物選擇健康清潔級同種系Wistar大鼠50只，雄性，體重200-250g，鼠齡8周。根據體重，隨機分為對照組(COntrol Group，C)、模型組(Model，M)、中藥組(Herb Group，H

2、)、西藥組(Western Group，W)及中西藥結合組(IntegratedGroup，Ⅰ)五組，每組10只。各組動物均進行手術安裝電極，用以記錄腦電、肌電活動，術后休息一周的動物采用限制性制動的方法造模，各藥物組分別灌胃給予中藥加味逍遙散、西藥舒樂安定以及中西藥加味逍遙散及舒樂安定各一半，每天制動給藥，在第1、3、5、7、10、15天制動后進行睡眠監(jiān)測。第15天取材，將以上五組動物分別用于組織學檢測，觀察各組中縫核、海馬區(qū)域P物質

3、(SP)免疫組織化學改變；同時利用透射電鏡觀察對照組、模型組、中藥組以上區(qū)域的超微結構；另外，利用高效液相法檢測這三組血清、中縫核 5-羥色胺(5-HT)的含量及血清、下丘腦去甲腎上腺素(NE)的含量。 結果： 1大鼠睡眠時相：1.1與對照組比較，限制性制動模型組大鼠第1、3、5、7、10、15天覺醒(W)時間分別增加，非快眼動睡眠(NREMs)和快眼動睡眠(REMs)時間分別減少。1.2與限制性制動模型組比較，西藥治療組

4、大鼠第1，3，5天W時間分別減少，第7，10，15天W時間分別增加；中藥治療組大鼠第1天W時間增加；第3，5，7，10，15天W時間分別減少；中西藥結合治療組大鼠第1，3，5，7，10，15天W時間分別減少。1.3與模型組比較，西藥治療組大鼠第1，3，5，7天NREMs時間分別增加，第10，15天NREMs時間分別減少；中藥治療組大鼠第1天NREMs時間分別減少，第3，5，7，10，15天NREMs時間分別增加；中西藥治療組大鼠第1，3

5、，5，7，10，15天NREMs時間分別增加。1.4與模型組比較，西藥治療組第1，5，7，10，15天REMs時間分別增加，第3天REMs時間減少；中藥治療組第1，5，7，10天REMs時間分別增加，第3，15天REMs時間分別減少：中西藥治療組第1，3，5天REMs時間分別減少，第7，10，15天REMs時間分別增加；1.5模型組大鼠造模后覺醒次數增多；中藥加味逍遙散調治后覺醒次數減少。1.6模型組大鼠第1，3，5，7，10，15天N

6、REMs 6波分別減少；與模型組相比，中藥加味逍遙散調治后第1，3，5，7，10，15天NREMsδ波分別增加。 2 組織學鑒定：2.1電鏡下可見心理應激性失眠大鼠中縫核以及海馬神經元細胞核染色質濃縮并邊集；粗面內質網擴張、排列紊亂和脫顆粒；線粒體腫脹，部分空泡樣變性；高爾基復合體腫脹和極性消失；髓鞘板層排列疏松、間隙加大，內部軸突神經絲松解、彎曲：突觸結構分界不清，突觸小泡稀疏。中藥組與對照組比較無明顯病變。2.2正常對照組S

7、p主要分布于神經元細胞的胞體，胞核胞質均有表達，呈棕色顆粒狀。心理應激模型組SP陽性神經元數目明顯減少，染色變淺。中藥加味逍遙散或中西藥結合治療后SP陽性細胞表達增多。 3 神經遞質含量：3.1血清和中縫核5-HT含量變化：與正常組相比，模型組血清5-HT輕度下降，中縫核5-HT明顯下降。與模型組相比，中藥調治后血清5-HT輕度升高，中縫核5-HT明顯升高。3.2血清和下丘腦NE含量變化：與正常組相比，模型組血清和下丘腦NE含量

8、升高，經加味逍遙散調治后，血清和下丘腦NE含量明顯下降。 結論： 1利用限制性制動方法建立大鼠心理應激性失眠模型是可行的。 2 限制性制動模型可以引起大鼠中縫核、海馬超微結構改變以及中樞神經遞質含量發(fā)生變化。 3 中藥加味逍遙散或者中西藥合劑調治心理應激性失眠的療效較明確穩(wěn)定，可以減少覺醒時間，增加NREMs。同時使受損害的海馬、中縫核得到部分修復，神經遞質的含量也基本恢復正常。 4 中藥加味逍遙散