DEHP對(duì)大鼠孕酮合成及StAR、P450scc基因表達(dá)影響的研究.pdf

1、目的:
　　探討鄰苯二甲酸二(2-乙基己基)酯(Di-2-ethylhexyl phthalate, DEHP)的暴露對(duì)青春期雌性大鼠孕酮分泌水平的影響,以及對(duì)孕酮合成的限速步驟——類固醇急性調(diào)節(jié)蛋白(StAR)、膽固醇側(cè)鏈裂解酶(P450scc)的基因表達(dá)的影響。通過對(duì)青春期雌性大鼠短期染毒,對(duì)參與激素合成有關(guān)基因的表達(dá)水平進(jìn)行分析,初步探討DEHP對(duì)雌性生殖毒性的可能機(jī)制。預(yù)期結(jié)果將為DEHP的生殖內(nèi)分泌干擾研究提供基礎(chǔ)資料,

2、為闡明環(huán)境內(nèi)分泌干擾物的生殖內(nèi)分泌干擾機(jī)制及其危害防治研究提供重要的科學(xué)依據(jù)。
　　方法:
　　1、取青春期的雌性SD大鼠32只,隨機(jī)分到對(duì)照組和DEHP(低、中、高)三個(gè)實(shí)驗(yàn)組中,四個(gè)劑量組每組8只。按10 mg/kg/d、100 mg/kg/d和1000 mg/kg/d DEHP分別對(duì)各實(shí)驗(yàn)組大鼠進(jìn)行灌胃,并用溶劑(玉米油)作為對(duì)照為對(duì)照組進(jìn)行灌胃。
　　2、連續(xù)灌胃10天,采集大鼠的血液,分離血清,測定孕酮含量;

3、取大鼠卵巢組織提取總 mRNA,逆轉(zhuǎn)錄 PCR( Reverse Transcription Polymerase Chain Reaction,RT-PCR)分析測定StAR和P450scc基因表達(dá)水平。
　　3、應(yīng)用Excel錄入數(shù)據(jù),統(tǒng)計(jì)學(xué)分析使用SPSS19.0進(jìn)行,以α=0.05的檢驗(yàn)標(biāo)準(zhǔn),判斷差異是否具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
　　結(jié)果:
　　1、模型效果
　　鄰苯二甲酸單乙基己基酯(Mono-2-ethylh

4、exyl phthalate,MEHP)是DEHP的初級(jí)代謝產(chǎn)物,大鼠血清中MEHP含量隨著染毒劑量增加呈上升趨勢,說明動(dòng)物染毒成功。
　　2、大鼠體重和卵巢重量變化
　　隨著染毒時(shí)間延長,各組大鼠體重均增加;隨著染毒劑量的增高,體重增加量有減小趨勢。隨著染毒劑量的增加雙側(cè)卵巢重量逐漸減小,高劑量組(1000mg/kg)與其他三組比較,卵巢重量減少有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。
　　3、血清中孕酮的檢測結(jié)果
　　

5、低劑量組(10mg/kg)比對(duì)照組(0mg/kg)和中劑量組(100mg/kg)的血清孕酮水平略高,但差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義;高劑量組(1000mg/kg)血清孕酮水平明顯高于其他三組(P<0.01)。
　　4、各劑量組大鼠StAR mRNA、P450scc mRNA的相對(duì)表達(dá)量
　　隨著染毒劑量的增加,StAR mRNA和P450scc mRNA表達(dá)量降低,中劑量組(100mg/kg)和高劑量組(1000mg/kg)與對(duì)照組比較