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文檔簡(jiǎn)介
1、目的:
研究樹(shù)突狀細(xì)胞(DC)成熟前后的形態(tài)及其微絲蛋白的適應(yīng)性變化。
材料和方法:
經(jīng)重組小鼠粒細(xì)胞.巨噬細(xì)胞集落刺激因子、白細(xì)胞介素-4誘導(dǎo)小鼠骨髓單核細(xì)胞為未成熟樹(shù)突狀細(xì)胞(imDC),培養(yǎng)至第6天時(shí),用脂多糖(LPS)誘導(dǎo)成成熟樹(shù)突細(xì)胞(mDC),在倒置相差顯微鏡和熒光顯微鏡下觀察并前后對(duì)比分析細(xì)胞在成熟前后的表面突起和內(nèi)部微絲蛋白(Filament.Actin,F-Actin)的變化。
2、
結(jié)果:
1.mDC高表達(dá)CD11c、MHC-Ⅱ和CD86。
2.成熟前的DC體積較小,隨著細(xì)胞的成熟,直徑逐漸增大,成熟過(guò)程中,DC表面突起逐漸增多、變粗且變長(zhǎng),呈怒張狀,在第7天達(dá)到高峰,以后突起逐漸松弛變軟,最后又回復(fù)至短細(xì)、稀疏狀態(tài)。
3.微絲蛋白主要集中于細(xì)胞膜和觸突上,其平均熒光強(qiáng)度在LPS刺激24 h后最高,48 h后明顯降低:細(xì)胞內(nèi)F-肌動(dòng)蛋白在成熟過(guò)程中逐漸減低,
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