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文檔簡介
1、目的:研究催產素(OT)對孕晚期胎鼠海馬的神經保護作用及其機制。 方法:①研究材料:孕20天健康普通級SD大鼠8只。②胎鼠腦片制備:孕大鼠剖宮產娩出胎鼠,迅速剝出胎鼠全腦并切割成厚2-3mm的腦片,置于溫度為(32.0±0.5)℃的人工腦脊液(ACSF)中并通入混合氣體95%O2、5%CO2孵育2~3 h備用。③分組與藥物干預濃度:對照組,缺氧組,10-4mol/Lγ-氨基丁酸(GABA)組,10-6、10-7、10-8mol/
2、L催產素聯合10-4mol/Lγ-氨基丁酸(OT+GABA)組,10-6mol/L催產素聯合10-4mol/L荷包牡丹堿(BIC)聯合10-4mol/Lγ-氨基丁酸(OT+BIC+GABA)組。④給藥方法:除對照組及缺氧組外其余各組腦片依次用含干預濃度藥物的ACSF的灌流,保持氣體95%O2、5%CO2通入。⑤腦損傷模型:經過缺氧無糖模型(OGD)15分鐘誘導腦片的損傷。⑥評價指標:蘇木精-伊紅染色法(H-E)、尼氏染色和原位末端標記法
3、(TUNEL)評價腦片損傷程度。 結果:①對照組與缺氧組相比:H-E染色顯示對照組較缺氧組海馬層次清楚、細胞排列整齊、細胞形態(tài)規(guī)整、極少見凋亡細胞,尼氏染色顯示對照組CA1、CA3區(qū)神經元密度較缺氧組高(P<0.01),TUNEL顯示對照組CA1、CA3區(qū)神經元凋亡數目較缺氧組少。②缺氧組與GABA組、OT+GABA組、OT+BIC+GABA組相比:H-E染色顯示OT+GABA組較缺氧組、GABA組、OT+BIC+GABA組海馬
4、層次清楚、細胞排列整齊、細胞形態(tài)規(guī)整、較少見細胞腫脹或核固縮壞死,尼氏染色顯示OT+GABA組CA1、CA3區(qū)神經元密度較缺氧組、GABA組、OT+BIC+GABA組高,TUNEL顯示OT+GABA組CA1、CA3區(qū)神經元凋亡數目較缺氧組、GABA組、OT+BIC+GABA組少。③缺氧組與10-6、107~、10-8mol/LOT+GABA組相比:H-E染色顯示缺氧組較OT+GABA各濃度組病理改變明顯、OT+GABA各濃度組間無明顯病
5、理形態(tài)差異,尼氏染色顯示缺氧組CA1、CA3區(qū)神經元密度較OT+GABA各濃度組低、OT+GABA各濃度組間神經元密度差異無統(tǒng)計學意義,TUNEL顯示缺氧組CA1、CA3區(qū)神經元凋亡數目較OT+GABA各濃度組多,OT+GABA各濃度組間神經元凋亡數目差異無統(tǒng)計學意義。 結論:①本實驗成功建立的缺氧無糖模型可有效誘導胎鼠離體腦片海馬的損傷。②催產素降低孕晚期胎鼠海馬OGD模型后的損傷,可能是通過減少神經元的凋亡來發(fā)揮神經保護作用
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