腎用劑量多巴胺對家兔腎功能的影響及其與體液因素的關(guān)系.pdf

1、目的：自1964年Goldberg等報道[1]小劑量多巴(3μg·kg-1·min-1)應(yīng)用于對腎臟疾病的治療以來，“腎劑量”多巴胺(Renal-dose dopamine，RDA，是指輸入速率為0.5～5.0μg·kg-1·min-1的多巴胺)一直廣泛應(yīng)用于臨床，并成為一種重要的腎臟保護(hù)藥物。Schwartz[2]在1997年的報道中提到應(yīng)用小劑量多巴胺(3μg·kg-1·min-1)可以增加腎小球濾過率(glomerular fit

2、ration rate，GFR)和腎血流量，產(chǎn)生利尿作用，且不引起正性變力效應(yīng)，即所謂RDA具有特異性改善腎功能的作用。但目前的很多研究[3-4]都表明不能將多巴胺對腎臟發(fā)揮的作用與其對全身血流動力學(xué)的影響區(qū)分開來。RDA對腎臟的作用機(jī)制尚需進(jìn)一步研究。本文通過觀察①RDA和多巴酚丁胺(dotutamine，DOB)對家兔在體腎功能的不同影響；②RDA對家兔離體灌流腎(isolated perfusedkidney，IPK)腎血管的舒張

3、效應(yīng)和腎功能的影響，進(jìn)一步探討RDA對家兔腎功能的影響及其與全身體液因素的關(guān)系，為臨床用藥提供實驗依據(jù)。 方法：①實驗分組：研究對象為健康雄性日本大耳白兔(本校實驗動物中心提供)，體重1.5～2.5千克，共42只，分別進(jìn)行在體和離體實驗。在體實驗，實驗動物隨機(jī)分為對照組(給予0.9％的氯化鈉溶液)、RDA組(給予10μg·kg-1·min-1的RDA)和DOB組(給予15μg·kg-1·min-1的DOB)。每組家兔6只，均采取

4、耳緣靜脈給藥，對比RDA和DOB對家兔尿量、尿鈉排泄分?jǐn)?shù)(fractional excretion of sodium，F(xiàn)ENa)、GFR和心率的影響，研究血液動力學(xué)在腎功能改善中的作用。離體實驗，實驗動物隨機(jī)分為對照組(給予0.9％的氯化鈉溶液)、去甲腎上腺素(norepinephrine，NE)組(給予不同濃度的NE)、RDA組(同時給予NE和RDA)和氟哌啶醇組(同時給予NE、RDA和氟哌啶醇)。每組家兔6只，各種物質(zhì)均在家兔離體

5、腎腎動脈端用微量注射泵(10mL/min)注入。應(yīng)用IPK技術(shù)，觀察分別給予生理鹽水、RDA、RDA和氟哌啶醇(多巴胺受體拮抗劑)后，腎血管對NE反應(yīng)性的變化，研究RDA對腎血管的舒張作用；觀察RDA對家兔IPK中尿量、FENa、GFR和腎素分泌的影響，進(jìn)一步探討RDA對腎功能的影響及其與體液因素的關(guān)系。②在體實驗實施：實驗動物均禁食12小時，自由飲水，用20％烏拉坦(urethane 4ml/kg)耳緣靜脈注射麻醉家兔。將家兔放入兔盒

6、中平衡穩(wěn)定20min，然后實施氣管插管，實施右頸動脈插管以備連接生理壓力測試儀；監(jiān)測實驗期間心率的變化；以22號套管針行耳緣靜脈穿刺置管以備輸液和給藥，輸液速率均為3mL/min，液體中菊粉濃度為1.0g/L；留置導(dǎo)尿管以備收集尿標(biāo)本。正式實驗后，每30min收集尿樣一次，離心以備檢測。每次留尿的中點留取動脈血2ml，離心后將血漿分置兩管，用于檢測菊粉濃度及其它生化指標(biāo)。實驗期間連續(xù)記錄心率的變化。以上指標(biāo)用家兔體重進(jìn)行校正。③離體實驗

7、實施：IPK模型的建立，耳緣靜脈麻醉后，游離家兔左側(cè)輸尿管、腎動脈、腎靜脈，并將兔腎坐在家兔腹腔內(nèi)以保持其溫度。經(jīng)輸尿管插管收集尿液，腎動、靜脈插管進(jìn)行灌注。在腎動脈入口處接壓力換能器與生理壓力測試儀相連。用加溫至37℃的Krebs液進(jìn)行灌注，調(diào)節(jié)灌流速率(Derfusion flow，PF)為10mL/min，灌注壓維持在13.3～18.7kPa之間，平衡20min后開始實驗。液體中菊粉濃度為0.2g/L，NE濃度分別為0.01、0.

8、1、1、10、100×10-7mol/L氟哌啶醇劑量為0.02mg·kg-1，RDA的濃度為0.4mg/L輸入速率為2.0μg·kg-1·min-1。實驗期間連續(xù)記錄腎動脈灌注壓(perfusion pressure，PP)的變化。每30分鐘收集尿樣一次。所得標(biāo)本均離心后以備檢測。④指標(biāo)測定：采用菊粉清除率法計算GFR；自動生化分析儀測定尿液和灌流液鈉含量；按公式[FENa=(尿流率×尿鈉含量)/(Cin×灌流液鈉含量)×100％]計算

9、出FENa;放射免疫分析法測定IPK靜脈端液體中腎素活性(renin activity，RA)。所得結(jié)果采用SPSS 11.5進(jìn)行統(tǒng)計學(xué)處理。各項指標(biāo)以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差((-x_±s)表示，兩兩比較用配對t檢驗，相關(guān)性采用Pearson相關(guān)分析，以P＜0.05為差異有顯著性。結(jié)果： 1.RDA和DOB對家兔在體腎臟機(jī)能的影響RDA組和DOB組的心率，均較對照組增快，用藥60min時，RDA組平均增加9.57％，DOB組平均增加11.

10、0％，均有顯著差異(P＜0.05)；60min時RDA組尿量和FENa分別為0.101±0.007ml·kg-1·min-1和0.833±0.009％，DOB組尿量和FENa分別為0.068±0.004ml·kg-1·min-1和0.814±0.008％，較對照組均增加(P＜0.05)，但RDA組比DOB組增加的幅度更大(P＜0.05)；60min時RDA組GFR為2.609±0.031ml·kg-1·min-1,DOB細(xì)GFR為2.6

11、26±0.102ml·kg-1·min-1，與對照組相比差異有顯著性(P＜0.05)，但兩組之間無顯著差異(P＞0.05) 2 RDA對IPK腎血管的影響腎血管對NE有良好的收縮性，并在180min內(nèi)維持生理機(jī)能。RDA對腎血管有明顯的舒張作用PP分別下降50％～70％(P＜0.05)，此效應(yīng)可被特異性DA受體拮抗劑氟哌啶醇阻斷。 3.RDA對家兔IPK尿量的影響對照組家兔尿量在實驗過程中一直保持穩(wěn)定，給予生理鹽水后尿量雖略有上

12、升，但無統(tǒng)計學(xué)差異(P＞0.05)。實驗組給藥后尿量逐漸上升，與給藥前差異顯著(P＜0.05)，用藥后60min時升高達(dá)用藥前的47.5％，后逐漸回降。 4 RDA對家兔IPK和FENa的影響對照組家兔FENa，在實驗過程中一直保持穩(wěn)定。應(yīng)用RDA后FENa立即上升，于60min左右達(dá)到峰值1.2％，比用藥前增加2倍(P＜0.05)。 5尿量與FENa的相關(guān)性分析將RDA組相同時間點尿量和尿鈉排泄分?jǐn)?shù)進(jìn)行相關(guān)性分析。尿量

13、與FENa之間的相關(guān)系數(shù)(r)為0.62，統(tǒng)計學(xué)結(jié)果顯示應(yīng)用RDA后，家兔IPK的尿量與FENa之間存在相關(guān)性(P＜0.01)。 6 RDA對家兔IPK、RA、GFR和PP的影響對照組給藥后PP略有上升，但在90min內(nèi)無統(tǒng)計學(xué)差異。RDA組給藥后PP立即下降，60min時為12.1Kpa，與給藥前13.7Kpa差異顯著(P＜0.05)；用藥前后腎素分泌和GFR均無顯著差異。 結(jié)論： 腎劑量多巴胺可以通過減少IP