流式細胞術快速檢測假絲酵母菌藥物敏感性方法的建立及應用.pdf

1、目的: 建立基于流式細胞術快速檢測假絲酵母菌臨床菌株藥物敏感性或耐藥性的方法。
　　方法: 以碘化丙錠(PI)為熒光染料，采用白假絲酵母菌ATCC90029株確定流式藥敏試驗門設置及最佳實驗條件。采用所建立的真菌流式藥敏試驗檢測110株假絲酵母菌臨床菌株對氟康唑和伏立康唑的敏感性或耐藥性并與經典的M27-A3常量稀釋法進行比較。
　　結果: 調整電壓可將白假絲酵母菌ATCC90029株活菌與死菌在流式細胞儀SS/log(FL

2、3)門中分為邊界清晰的兩群細胞，不同比例死菌與活菌混合液與流式藥敏試驗檢測值之間有高度相關性(r=0.999)。流式藥敏試驗30 min內可出結果，其最適菌液濃度為1.0×106/ml、藥物與真菌最適孵育時間為3h、最佳染色方法及時間為脫氧膽酸鈉預處理后PI染色5 min。流式藥敏試驗與M27-A3常量稀釋法對110株假絲酵母菌臨床菌株對氟康唑和伏立康唑敏感或耐藥總符合率分別為98.2％和87.3％。
　　結論: 較之經典的常量稀