小鼠精原干細胞分離、純化和移植以及藍狐卵母細胞電脈沖刺激的研究.pdf

1、本研究論文包括兩部分內容，一部分是關于小鼠精原干細胞的研究，另一部分是關于藍狐卵母細胞體外成熟和電脈沖刺激的研究。 小鼠精原干細胞的研究包括4個實驗：實驗一、小鼠胚胎成纖維細胞飼養(yǎng)層的制作，為本實驗室正在開展的胚胎干細胞和精原干細胞研究提供了飼養(yǎng)層細胞，建立了小鼠胚胎成纖維細胞系；實驗二、小鼠精原干細胞的分離純化，通過兩步酶消化法分離6～8日齡小鼠睪丸細胞，Percoll不連續(xù)密度梯度離心，獲得了較多數量的活細胞，可用于進一步培

2、養(yǎng)和移植；實驗三、精原干細胞移植模型小鼠的制作，通過對4周齡昆明白小鼠腹腔內單次注射白消安(30mg/kg和40mg/kg體重)，30天后獲得了可用作精原干細胞移植的受體模型小鼠；實驗四、小鼠精原干細胞移植，成功通過睪丸網注射精原干細胞，建立了小鼠精原干細胞移植體系，為轉基因動物生產開辟了新途徑。 藍狐卵母細胞體外成熟培養(yǎng)部分共一個實驗：藍狐卵母細胞體外成熟和電脈沖刺激的研究，采集乏情期藍狐卵巢，切割法獲得卵母細胞，體外成熟不同