骨骼肌等長(zhǎng)收縮缺血訓(xùn)練對(duì)遠(yuǎn)隔缺血部位血管新生的作用和機(jī)理.pdf

1、目的：以等長(zhǎng)收縮運(yùn)動(dòng)作為缺血訓(xùn)練模型，研究正常骨骼肌等長(zhǎng)收縮運(yùn)動(dòng)造成缺血所誘導(dǎo)的血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子(VEGF)表達(dá)上調(diào)是否可以到達(dá)遠(yuǎn)隔部位，造成遠(yuǎn)隔病理性缺血組織側(cè)支循環(huán)的建立。 方法：試驗(yàn)分為同側(cè)骨骼肌試驗(yàn)、遠(yuǎn)隔骨骼肌試驗(yàn)和心臟試驗(yàn).同側(cè)骨骼肌試驗(yàn)對(duì)比電刺激誘導(dǎo)的不同肌肉收縮方式對(duì)肌肉局部VEGF表達(dá)的影響。實(shí)驗(yàn)分為正常對(duì)照組(NC)：下肢植入電極不施加刺激；等長(zhǎng)收縮組(IE)：用40Hz、2.5mA、lms電刺激使骨骼肌產(chǎn)生等

2、長(zhǎng)收縮；等張收縮組(DE)：用1Hz、2.5mA、1ms電刺激使骨骼肌產(chǎn)生等張收縮。實(shí)驗(yàn)持續(xù)一周后取材，Western blot測(cè)定VEGF蛋白表達(dá)。 在同側(cè)骨骼肌試驗(yàn)的基礎(chǔ)上進(jìn)行遠(yuǎn)隔骨骼肌及心肌試驗(yàn)。遠(yuǎn)隔骨骼肌試驗(yàn)采用新西蘭兔左側(cè)股動(dòng)脈結(jié)扎造成骨骼肌缺血，右側(cè)坐骨神經(jīng)植入電極，動(dòng)物分成四組。對(duì)照組(FAO-N)：不施加刺激；高強(qiáng)度等長(zhǎng)收縮組(FAO-HE)：電刺激方案同IE組；低強(qiáng)度等長(zhǎng)收縮組(FAO-LE)：以0.3mA、4

3、0Hz、1ms電刺激產(chǎn)生低強(qiáng)度等長(zhǎng)收縮；雙側(cè)結(jié)扎等長(zhǎng)收縮組(BFAO-HE)：結(jié)扎雙側(cè)股動(dòng)脈，右側(cè)坐骨神經(jīng)植入電極，電刺激方案同IE組。 心臟試驗(yàn)采用兔冠狀動(dòng)脈左室支安裝氣囊縮窄器，制作心肌缺血模型。心肌缺血方式為每次2分鐘，每天兩次，間隔1小時(shí)。試驗(yàn)動(dòng)物分為三組。假手術(shù)組(MI-S)：植入氣囊后不施加刺激；單純?nèi)毖M(MI-N)：給予心肌缺血刺激；心肌缺血伴等長(zhǎng)收縮組(MI-HE)：在心肌缺血刺激的同時(shí)給予一側(cè)下肢坐骨神經(jīng)電刺

4、激，方案同IE組。兩組試驗(yàn)持續(xù)時(shí)間4周。在手術(shù)日及取材日注入微球以測(cè)定訓(xùn)練前后缺血區(qū)域側(cè)支血流量。免疫組化測(cè)定毛細(xì)血管密度及VEGF蛋白表達(dá)，Western-Blot測(cè)定VEGF蛋白，RT-PCR測(cè)定VEGF的mRNA。 結(jié)果：同側(cè)骨骼肌實(shí)驗(yàn)IE肌肉VEGF蛋白升高顯著高于DE組(P<0.05)及NC組(P<0.05)，但DE組與NC組無(wú)差異。 遠(yuǎn)隔骨骼肌試驗(yàn)FAO-HE組缺血下肢局部血流量(P<0.01)及毛細(xì)血管密度

5、(P<0.001)明顯高于其它三組。FAO-HE組VEGF蛋白(P<0.01)及mRNA(P<0.001)表達(dá)與其它組比較也明顯升高，而其余各組間無(wú)明顯差異。 心臟試驗(yàn)中缺血心肌側(cè)支血流量及毛細(xì)血管密度MI-HE組最高，而MI-N組也明顯升高。VEGF mRNA表達(dá)MI-HE組與MI-N組相比P<0.01，MI-N與MI-S組比較P<0.01。VEGF蛋白表達(dá)MI-HE組與MI-N組相比P<0.05，MI-N與MI.S相比P<0