過表達Daxx對Chol-MβCD誘導血管平滑肌細胞凋亡的作用研究.pdf_第1頁
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文檔簡介

1、目的：探討Daxx對Chol:MβCD誘導的血管平滑肌細胞凋亡的影響以及可能的機制。
　　方法：體外培養(yǎng)大鼠源性血管平滑肌細胞，然后分別將人源性 pcDNA3.1(+)， pcDNA3.1(+)-Daxx質粒瞬時轉染進入血管平滑肌細胞中，并通過 RT-PCR和Western Blot兩種方法檢測平滑肌細胞內 Daxx的表達；然后再用10mg/L Chol:MβCD孵育48小時，建立泡沫細胞模型，油紅O染色檢測細胞內脂滴情況。再分別

2、采用 CCK-8法檢測血管平滑肌細胞的細胞活性，流式細胞術檢測血管平滑肌細胞的凋亡情況。Western Blot檢測ASK1，P-JNK的表達情況。為了進一步明確JNK通路在Chol:MβCD誘導的平滑肌細胞凋亡中發(fā)揮的作用，我們采用JNK特異性抑制劑SP600125對其Chol:MβCD誘導的平滑肌細胞進行干預。
　　結果：轉染后細胞經RT-PCR和Western Blot檢測細胞內Daxx表達明顯增加；用Chol:MβCD孵育

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