NKG2d-sMICA在上皮性卵巢癌中的表達及意義.pdf

1、目的:通過檢測上皮性卵巢癌患者血清中自然殺傷細胞(naturalkillercell,NKcell)配體MICA的可溶性形式(solubleMICA,sMICA)、腫瘤組織中MICA的膜性形式(membraneMICA,mMICA)以及外周血中NK細胞表面活化性受體NKG2D表達水平,探討上皮性卵巢癌患者sMICA、mMICA、NKG2D的表達水平與上皮性卵巢癌細胞分化程度、組織學類型、臨床分期的關系,以及sMICA、mMICA與NK細

2、胞表面活化性受體NKG2D表達的相關性,探討NKG2D-sMICA與上皮性卵巢癌免疫逃逸的關系及臨床意義。
　　 方法:選取2012年2-10月河北醫(yī)科大學第四醫(yī)院婦科上皮性卵巢癌患者血清、癌組織及外周血55例為實驗組,以30例卵巢上皮性良性腫瘤及15例子宮肌瘤患者血清、卵巢組織及外周血為對照組。采用ELISA法檢測三組血清中sMICA的水平;免疫組化(Immunohistochemicalmethod)二步法檢測組織mMICA

3、的表達;流式細胞術三標抗體確定NK細胞并檢測外周血NKG2D表達水平。應用SPSS13.0統(tǒng)計分析軟件分析實驗數(shù)據,以p＜0.05為差異有統(tǒng)計學意義。
　　 結果:
　　 1.酶聯(lián)免疫吸附試驗:sMICA表達水平(ng/ml)
　　 1.1上皮性卵巢癌組、良性腫瘤組、正常組血清中sMICA表達水平分別為(22.98±6.58)、(10.92±3.05)、(3.68±1.87),惡性組與良性組、正常組比較,差異有統(tǒng)

4、計學意義(t=5.134，P=0.002;t=15.80,P=0.000,P＜0.05)。
　　 1.255例上皮性卵巢癌中,低分化者35例,高中分化者20例,血清sMICA表達水平分別為(27.07±4.32)、(16.52±4.11),兩者比較,差異有統(tǒng)計學意義(t=8.858,p=0.030,p＜0.05)。
　　 1.355例上皮性卵巢癌中,Ⅰ～Ⅱ期12例,Ⅲ～Ⅳ期43例,血清sMICA表達水平分別為(14.43

5、±2.51)、(25.49±5.16),兩者比較,差異有統(tǒng)計學意義(t=10.794,P=0.017,P＜0.05)。
　　 1.455例上皮性卵巢癌患者中,22例子宮內膜樣癌患者血清sMICA表達水平為(21.93±6.67);15例漿液性癌患者血清sMICA表達水平為(23.08±6.59);8例粘液性癌患者血清sMICA表達水平為(22.78±5.64);10例低分化腺癌患者血清sMICA表達水平為(25.73±7.11)

6、。四組比較,差異無統(tǒng)計學意義(F=0.764,P=0.520,P＞0.05)。
　　 2.免疫組化二步法:
　　 2.155例上皮性卵巢癌中,35例癌組織mMICA蛋白表達陽性,陽性表達率為63.64％;30例卵巢上皮性良性腫瘤中,2例mMICA蛋白表達陽性,陽性表達率為6.67％;15例正常卵巢上皮性組織mMICA無陽性表達,惡性組與良性組比較差異明顯,有統(tǒng)計學意義(X2=37.392,P=0.000,P＜0.05)。

7、
　　 2.235例低分化者中,18例mMICA的高表達,其陽性表達率為51.43％;20例高中分化者中17例mMICA的高表達,其陽性表達率為85％,兩者比較,差異有統(tǒng)計學意義(X2=4.636,P=0.046,P＜0.05)。
　　 2.312例Ⅰ～Ⅱ期卵巢癌中11例mMICA高表達,陽性表達率為91.67％;43例Ⅲ～Ⅳ期卵巢癌患者中24例mMICA高表達,其陽性表達率為55.81％。兩組比較差異有統(tǒng)計學意義(X2

8、=6.191,P=0.039,P＜0.05)。
　　 2.4不同組織學類型上皮性卵巢癌mMICA表達:22例子宮內膜樣癌中有14例,陽性率為63.64％;15例漿液性癌中有10例,陽性率為66.67％;8例粘液性癌中有5例,陽性率為62.5％;10例低分化腺癌中有6例,陽性率為60％,差異無統(tǒng)計學意義(P=0.989,P＞0.05)。
　　 3.流式細胞術結果:NKG2D表達水平(‰)
　　 3.1上皮性卵巢癌組

9、、良性腫瘤組、正常組NKG2D表達水平分別為(3.8628±1.8044)、(21.0901±6.7900)、(38.9403±8.9249)。上皮性卵巢癌組與良性腫瘤組、正常組比較,NKG2D表達水平明顯降低,差異有統(tǒng)計學意義(t=11.198,P=0.000;t=17.875,P=0.000,P＜0.05)。
　　 3.255例上皮性卵巢癌中,35例低分化者與20例高中分化者NKG2D表達水平分別為(2.7348±0.991

10、4)、(5.5161±1.4384)。兩組比較,差異有統(tǒng)計學意義(t=8.471,P=0.000,P＜0.05)。
　　 3.3上皮性卵巢癌Ⅰ～Ⅱ期12例,Ⅲ～Ⅳ期43例,NKG2D表達水平分別為(6.4615±1.1530)、(3.0853±1.1695)。兩者比較,差異有統(tǒng)計學意義(t=7.313,P=0.008,P＜0.05)。
　　 3.455例上皮性卵巢癌患者中,22例子宮內膜樣癌患者NKG2D表達水平為(4.

11、1526±1.9648);15例漿液性癌患者NKG2D表達水平為(3.8631±1.8508);8例粘液性癌患者NKG2D表達水平為(3.7773±1.5185);10例低分化腺癌患者NKG2D表達水平為(3.3109±1.4625)。兩兩比較,差異無統(tǒng)計學意義(F=0.512,P=0.676,P＞0.05)。
　　 4.上皮性卵巢癌患者血清sMICA水平與NKG2D表達水平的相關性:
　　 4.155例卵巢癌血清sMI

12、CA與外周血NK細胞NKG2D表達水平的pearson相關系數(shù)為-0.896,二者呈負相關,具有統(tǒng)計學意義(p=0.000,P＜0.05)。
　　 4.235例低分化者血清sMICA與外周血NK細胞NKG2D表達水平的Spearman相關系數(shù)r=-0.981,兩者呈負相關,具有統(tǒng)計學意義(p=0.000,P＜0.05)。
　　 4.320例高中分化卵巢癌患者血清sMICA與外周血NK細胞NKG2D表達水平的pearson

13、相關系數(shù)r=-0.657,兩者呈負相關,具有統(tǒng)計學意義(p=0.002,P＜0.05)。
　　 4.412例Ⅰ～Ⅱ期卵巢癌患者血清sMICA與外周血NK細胞NKG2D表達水平的pearson相關系數(shù)r=-0.832,兩者呈負相關,具有統(tǒng)計學意義(p=0.002,P＜0.05)。
　　 4.543例Ⅲ～Ⅳ期卵巢癌患者血清sMICA與外周血NK細胞NKG2D表達水平的pearson相關系數(shù)r=-0.842,兩者呈負相關,具有

14、統(tǒng)計學意義(p=0.000,P＜0.05)。
　　 4.6不同組織學類型卵巢癌血清sMICA與外周血NK細胞NKG2D表達水平相關性:
　　 22例子宮內膜樣癌pearson相關系數(shù)r=-0.093,p=0.680;15例漿液性癌pearson相關系數(shù)r=-0.121,p=0.668;8例粘液性癌pearson相關系數(shù)r=-0.142,p=0.738;10例低分化腺癌pearson相關系數(shù)r=-0.384,p=0.273

15、。各組P值均大于0.05,血清sMICA與外周血NK細胞NKG2D表達水平無相關性。
　　 5.癌組織免疫組化評分≥3分為陽性,其陽性率與相應患者血清sMICA的相關性:
　　 5.135例陽性卵巢癌mMICA陽性細胞表達率與相應患者血清sMICA的Spearman相關系數(shù)為-0.668,二者呈負相關,具有統(tǒng)計學意義(P=0.000,P＜0.05)。
　　 5.218例陽性低分化卵巢癌mMICA陽性細胞表達率與相

16、應患者血清sMICA的Spearman相關系數(shù)為-0.752,二者呈負相關,具有統(tǒng)計學意義(P=0.000,P＜0.05)。
　　 5.317例陽性高分化卵巢癌mMICA陽性表達率與相應患者血清sMICA的Spearman相關系數(shù)為-0.875,二者呈負相關,具有統(tǒng)計學意義(P=0.000,P＜0.05)。
　　 5.411例陽性Ⅰ～Ⅱ期卵巢癌mMICA陽性表達率與相應患者血清sMICA的Spearman相關系數(shù)為-0.

17、506,二者無相關性,無統(tǒng)計學意義(P=0.078,P＞0.05)。
　　 5.524例陽性Ⅲ～Ⅳ期卵巢癌mMICA陽性表達率與相應患者血清sMICA的Spearman相關系數(shù)為-0.867,二者呈負相關,具有統(tǒng)計學意義(P=0.000,P＜0.05)。
　　 5.6不同組織學類型卵巢癌組織mMICA陽性表達率與患者血清sMICA水平之間相關系:14例陽性子宮內膜樣癌,Spearman相關系數(shù)為-0.108,P=0.61

18、3;10例陽性漿液性癌,Spearman相關系數(shù)為-0.366,P=0.219;5例陽性粘液性癌,Spearman相關系數(shù)為-0.494,P=0.447;6例陽性低分化腺癌,Spearman相關系數(shù)為-0.600,P=0.353;各組織學類型卵巢癌組織mMICA陽性表達率與患者血清sMICA水平無相關性。
　　 結論:上皮性卵巢癌患者血清中sMICA的水平、癌組織mMICA陽性表達率及NKG2D表達與卵巢腫瘤的分化程度、臨床分期