蛹蟲草液體培養(yǎng)及其有效成分含量分析.pdf

1、本文以蛹蟲草菌為實驗材料，系統而深入地研究了蛹蟲草液體發(fā)酵的培養(yǎng)基及培養(yǎng)條件的優(yōu)化，并在所得的優(yōu)化培養(yǎng)基及培養(yǎng)條件下進行擴大培養(yǎng)。然后對菌絲體和發(fā)酵液中的多糖，菌絲體中的蟲草素分別進行了含量測定，并對它們的提取純化工藝進行了研究，結果如下： 1.對接種量(％)、發(fā)酵溫度(℃)、初始pH值、發(fā)酵周期(h)進行單因素試驗分析。在此基礎上，對以上四因素進行四因素三水平的正交實驗分析。確定了最佳發(fā)酵條件為：接種量10％，發(fā)酵溫度27℃，

2、初始pH7，發(fā)酵周期96h。 2.以菌絲體干重及粗多糖重量為指標，對五種碳源進行多重比較。結果顯示：葡萄糖、麥芽糖、白糖、蔗糖、可溶性淀粉之間在0.05水平上均存在顯著差異(P＜0.05)。選用葡萄糖為最佳碳源，濃度應控制在4.0-5.0g/L之間。 3.以菌絲體干重及粗多糖重量為指標，對五種氮源進行多重比較。結果顯示：酵母膏、蛋白胨、硝酸鈉、氯化銨、牛肉膏之間在0.05水平上均存在顯著差異(P＜0.05)。選用蛋白胨為

3、最佳氮源，最適氮源濃度為2.0g/L。 4.以葡萄糖、蛋白胨、KH2PO4、FeSO4為原料，進行四因素三水平的正交試驗分析。結果顯示：對菌絲體得率影響最大的為葡萄糖，其次分別為蛋白胨、KH2PO4和FeSO4。最佳發(fā)酵培養(yǎng)條件為葡萄糖5g/100ml、蛋白胨0.2g/100ml、FeSO40.001g/100ml、KH2PO40.05g/100ml。 5.從最優(yōu)化培養(yǎng)基條件下進行擴大培養(yǎng)，對菌絲體及發(fā)酵液中粗多糖進行提

4、取、分離、純化，通過Sevage法除蛋白及葡聚糖凝膠柱層析，得到精多糖。結果為：菌絲體精多糖得率為1.7228g/100g干菌絲體；發(fā)酵液精多糖得率為0.1007g/L發(fā)酵液。通過標準曲線測得菌絲體中精多糖的含量為70.30％，發(fā)酵液中精多糖的含量為66.90％。 6.從最優(yōu)化培養(yǎng)基條件下進行擴大培養(yǎng)，對其進行菌絲體中蟲草素的提取、分離、純化，通過陰離子交換樹脂得到蟲草素結晶，得率為53.88mg/100g干菌絲體。對其進行含量