細(xì)胞周期調(diào)控劑增強(qiáng)X-射線對(duì)腫瘤細(xì)胞的殺傷作用及其機(jī)制研究.pdf

1、中國(guó)協(xié)和醫(yī)科大學(xué);中國(guó)醫(yī)學(xué)科學(xué)院博士學(xué)位論文細(xì)胞周期調(diào)控劑增強(qiáng)X-射線對(duì)腫瘤細(xì)胞的殺傷作用及其機(jī)制研究姓名：孫新臣申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別：博士專業(yè)：微生物與生化藥學(xué)指導(dǎo)教師：邵榮光;甄永蘇2002.5.1論文摘要細(xì)胞的D o 為5 ．6 3 G y ，對(duì)H T - 2 9 細(xì)胞的D o 為5 ．9 6 G y 。根據(jù)文獻(xiàn)資料，我們?nèi)? G y 的劑量，進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。檢測(cè)T e t 增強(qiáng)x 一射線對(duì)腫瘤細(xì)胞的殺傷力，結(jié)果表明p 5 3 突變型M C F

2、 一7 ／A D R 和H T - 2 9 細(xì)胞在照射后對(duì)T e t 更敏感。單用x 一射線處理M C F ．7 ／A D R 細(xì)胞，準(zhǔn)閾劑量( D q ) 值為2 ．2 9 G y ；X ．射線與T e t 合用，其D q 值為1 ．5 2 G y ，增敏比( S E R D q ) 為1 ．5 1 。對(duì)于H T - 2 9 細(xì)胞，單X 一射線處理D q 值為2 ．9 9 G y ：X 一射線與T e t 合用，其D q 值為1 ．9

3、 8 G y ，增敏比( S E R D q )為16 3 。對(duì)于p 5 3 野生型M C F 一7 細(xì)胞X 一射線與T e t 合用，D q 值為1 ．9 3 G y ，T e t 增效作用與p 5 3 基因功能有關(guān)。單用X 射線照射時(shí)D q 值為21 2 G y ，增敏比( S E R D 。) 為1 ．1 0 。結(jié)果顯示流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)T e t 對(duì)腫瘤細(xì)胞G 2 期的影響，結(jié)果顯示帶有野生型p 5 3基因的M C F ．7 細(xì)胞，

4、經(jīng)過4 G y X ．射線照射后，細(xì)胞阻滯于G l 期和G 2 期?而帶有突變型p 5 3 基因的M C F ．7 ／A D R 和H T - 2 9 細(xì)胞，在經(jīng)過4 G y X ．射線照射后，細(xì)胞阻滯于G 2 期。照射后加入T e t ，引起M C F 一7 ／A D R 和H T _ 2 9 細(xì)胞阻滯于G 2 期的百分比呈劑量依賴性的減少，而在M C F 一7 細(xì)胞這種變化不明顯。0 ．】p MT e t ，在M C F 一7 ／A

5、 D R 細(xì)胞，G 2 ／M 期的比率由照射的5 6 ％降低到3 5 ．7 ％；在H T - 2 9 細(xì)胞，G 2 ／M 期的比率由照射的5 7 ．3 ％降低到3 3 ．3 ％：在M C F ．7 細(xì)胞，G 2 ／M 期的比率由照射的3 1 ．1 ％降低到2 0 ．4 ％。結(jié)果說明突變型p 5 3 細(xì)胞對(duì)T e t 誘導(dǎo)的G 2 期阻滯的清除作用比野生型p 5 3 細(xì)胞更敏感。W e s t e r nB l o t t i n g 檢

6、測(cè)X ．射線和T e t 處理的細(xì)胞周期相關(guān)調(diào)控因子的變化。結(jié)果顯示，M C F ．7 ／A D R 細(xì)胞在受到4 G yX 一射線照射后，C y c l i nB 1 與C d c 2 蛋白的表達(dá)明顯降低，在加入T e t 后，C y c l i n B l 與C d c 2 蛋白的表達(dá)明顯增加，其中尤以T e t 濃度在1 9 M 時(shí)最明顯。在H T - 2 9 細(xì)胞中，我們也得到了類似的結(jié)果。經(jīng)照射和T e t 處理后，M C F

7、 ．7 ／A D R 細(xì)胞的對(duì)照組、單純4 G y X 一射線組、4 G y X ．射線+ 0 ．1 p M T e t 組的細(xì)胞分裂指數(shù)分別為4 ．9 ％、1 ．3 ％、1 4 ．7 ％；在M C F 一7 細(xì)胞，三組的分裂指數(shù)分別為5 ．5 ％、2 ．4 ％、7 ．1 ％；H T _ 2 9 細(xì)胞三組分裂指數(shù)分別為4 ．5 ％、】．5 ％，1 3 ．2 ％。結(jié)果表明T e t 能夠明顯提高受照射細(xì)胞的分裂指數(shù)，促使細(xì)胞進(jìn)入分裂期。我