超聲造影與血清蛋白質譜對肝細胞癌微波消融后復發(fā)轉移的研究.pdf

1、目的：探討肝細胞癌超聲造影表現(xiàn)與微波消融后復發(fā)轉移的關系，篩選與肝細胞癌復發(fā)轉移相關的血清差異蛋白質，尋求可能早期、無創(chuàng)且有效預測肝細胞癌微波消融治療后復發(fā)轉移的超聲造影與血清蛋白質譜相結合的預測模型。 資料與方法： 本研究中所有患者均符合以下入組條件：經穿刺活檢病理證實的肝細胞癌患者，病灶數(shù)目為單發(fā)，病灶最大直徑≦5cm，無血管侵犯及肝外轉移，肝功能Child-Pugh分級A～B級，無嚴重心、腦、腎、血管等疾病。

2、 (1)超聲造影研究組：對2006年3月～2007年11月行微波消融的65例肝細胞癌患者進行前瞻性研究，微波消融治療前均行超聲造影檢查，繪制時間-強度曲線，對復發(fā)組與未復發(fā)組進行單因素及多因素分析，篩選出與肝細胞癌復發(fā)轉移有關的超聲造影參數(shù)。 (2)血清蛋白質譜研究組：搜集56例肝細胞癌患者微波消融治療前及治療后的血清，采用CM10芯片為檢測介質，經SELDI-TOF-MS測定得到蛋白質譜，通過Ciphergen Protei

3、nChip Software標化，采用Biomarker Wizard軟件比較復發(fā)組和未復發(fā)組間血清蛋白質差異，利用Biomarker Pattens Software建立決策樹模型并進行盲法驗證。對復發(fā)組與未復發(fā)組微波治療前后的血清蛋白質豐度差值進行多因素分析，尋找與肝細胞癌微波消融治療后復發(fā)轉移相關血清蛋白質譜參數(shù)。 (3)對同時參加超聲造影和蛋白質譜研究的50例患者的資料進行分析，將肝細胞癌微波消融后復發(fā)轉移相關的超聲造影

4、指標與血清蛋白質譜參數(shù)相結合，建立預測肝細胞癌微波消融后復發(fā)轉移的人工神經網(wǎng)絡模型。 結果： (1)在本組研究病例中，肝細胞癌微波消融治療后復發(fā)組和未復發(fā)組的性別構成、年齡、病毒感染類型、術前AFP水平及腫瘤分化程度均無統(tǒng)計學差異。 (2)在復發(fā)組與未復發(fā)組肝細胞癌患者治療前超聲造影參數(shù)中，單因素分析結果顯示兩組病灶時間-強度曲線在肝實質達峰時間(p TTP)、腫瘤與肝實質達峰時間差值(t-p TTP)以及腫瘤與

5、肝實質峰值強度差值(t-p PI)三個參數(shù)上均具有顯著性差異。多因素進一步分析結果顯示，t-p TTP與t-p PI是肝細胞癌微波消融后復發(fā)轉移的危險因素。 (3)微波消融治療前復發(fā)組與未復組患者血清中發(fā)現(xiàn)7個蛋白峰有顯著差異。M/Z為5170和7688的蛋白峰在復發(fā)組中呈高表達，而M/Z為1103、6449、6646、6858、7787的蛋白峰在復發(fā)組中呈低表達。40例肝癌微波消融治療前患者的血清蛋白質譜建立的復發(fā)轉移決策樹判

6、斷模型，由M/Z為6858、1103的2個蛋白峰組成，其靈敏性為96.30％，特異性為76.92％，對16例肝癌微波消融治療前患者血清蛋白質譜進行盲法驗證，該模型盲法驗證的靈敏性為50％，特異性為75％。 (4)微波消融治療后復發(fā)組與未復組患者血清中發(fā)現(xiàn)26個蛋白峰有顯著差異。M/Z為4426、6207、7161、9670、10028、12150、12222、24006、28928、29021、29233的蛋白峰在復發(fā)組中呈高表

7、達，而M/Z為3943、4100、4299、4657、5077、5348、6446、6644、6855、7788、7992、8586、8708、8794、19966的蛋白峰在復發(fā)組中呈低表達。40例肝癌微波消融治療后患者的血清蛋白質譜建立的復發(fā)轉移決策樹判斷模型，由M/Z為4100、4657的2個蛋白峰組成，其靈敏性為92.59％，特異性為84.62％。對16例肝癌微波消融治療后患者血清蛋白質譜進行盲法驗證，該模型盲法驗證的靈敏性為62

8、.5％，特異性為75％。 (5) Logistic回歸分析結果顯示，M/Z為28700、20628、10868、2140、17300、2067的蛋白峰先后進入回歸方程。方程與實際資料的一致率達到95.8％。其中，M/Z為2140和17300的蛋白峰豐度差值是肝細胞癌微波消融后復發(fā)轉移的保護因素；而M/Z為2067、10868、20628、28700的蛋白峰豐度差值是肝細胞癌微波消融后復發(fā)轉移的危險因素。 (6)超聲造影與

9、血清蛋白質譜相結合建立的人工神經網(wǎng)絡模型與實際數(shù)據(jù)吻合性良好，訓練組的分類正確率達到100％；并且對肝細胞癌患者微波消融后復發(fā)情況具有較好的預測作用，預測組的分類正確率是83.3％，其中復發(fā)組的分類正確率是87.5％，未復發(fā)組的分類正確率是80％。 結論： (1)腫瘤與肝實質達峰時間差值(t-p TTP)、腫瘤與肝實質峰值強度差值(t-p PI)兩個參數(shù)是復發(fā)轉移的危險因素，有望成為微波消融治療后復發(fā)轉移的超聲造影預測指

10、標。 (2)由CM10芯片篩選出的微波消融治療術前及術后血清差異蛋白峰可能與肝癌術后復發(fā)轉移有關；決策樹模型對肝細胞癌患者微波消融治療的預后具有一定的預測作用。 (3)由M/Z為28700、20628、10868、2140、17300、2067的蛋白峰豐度差值建立的回歸方程能夠比較好地反映肝細胞癌患者微波消融治療的預后情況。 (4)超聲造影與血清蛋白質譜相結合建立的人工神經網(wǎng)絡模型對肝細胞癌患者微波消融后復發(fā)轉移