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文檔簡介
1、目的:為了制備出療效更好、服用更方便、更符合現(xiàn)代標準的中成藥,我們對赤丹丸(Chi dan pill CDP)的提取工藝進行優(yōu)化改進,并對應用優(yōu)化工藝提取的物質(zhì)進行藥效學研究,為赤丹丸的進一步研究提供理論依據(jù)。 方法: 一、提取工藝 采用L<,9>(3<'4>)正交水平表進行試驗,以提取物中芍藥苷、丹參酮ⅡA的含量為考察指標,考察乙醇濃度(A)、溶劑(乙醇、水)用量倍數(shù)(B)、提取時間(C)三種因素對提取結(jié)果的影
2、響,從而篩選出最佳的工藝條件。 二、芍藥苷、丹參酮Ⅱ A含量的測定一反相高效液相法 1、芍藥苷含量測定的方法色譜柱為Agilent Eclipse XDB-C<,18>(4.6×150 mm,5μm)柱,以乙腈-水-磷酸(17:83:0.1)為流動相,流速為1ml·min<'-1>,檢測波長230nm,柱溫為30℃。 2、丹參酮Ⅱ A的測定方法色譜柱為Agilent EclipseXDB-C18(4.6×150m
3、m,5μm)柱,流動相組成為水-甲醇(25:75),流速為1ml·min<'-1>,檢測波長為270nm,柱溫為25℃。 三、藥效學試驗 赤丹丸提取物(Optimun extract of chidall pill OECDP)對慢性盆腔炎模型大鼠的作用。采用苯酚膠漿致炎劑誘導的慢性盆腔炎模型大鼠,將模型大鼠分為OECDP大劑量組、中劑量組、小劑量組、CDP組、正常組、模型組、婦炎康組。光鏡下觀察大鼠子宮的組織學形態(tài),放
4、免法測定血清中白細胞介素Ⅱ(IL-2)和腫瘤壞死因子(TNF-a)的含量,測定全血的血液流變學,觀察有關各項指標的變化。初步探討OECDP對CPID的作用機制。觀察對小鼠耳廓腫脹和大鼠足腫脹炎癥模型的影響,考察其抗炎作用;對小鼠熱板法和醋酸扭體法所致動物疼痛反應的抑制作用,考察其鎮(zhèn)痛作用;通過小鼠耳廓毛細血管的變化,考察其對微循環(huán)的作用。 結(jié)果: 一、建立了赤丹丸的最佳提取工藝采用8倍量的75%乙醇回流1.5h,然后用1
5、0倍量的水再回流1.5h。通過此工藝得到的提取物中芍藥苷、丹參酮ⅡA含量最高。 二、藥效學試驗表明該提取物能夠降低小鼠的痛閾,減少小鼠的扭體次數(shù);能減輕耳、足腫脹的程度;能夠增加小鼠耳廓毛細血管的開放數(shù)量,擴張末梢動靜脈的口徑;能改善模型大鼠的血液流變學,緩解宮腔粘連閉塞或擴張,減輕子宮組織中炎細胞的浸潤,纖維結(jié)締組織的增生,治療組較模型組,IL-2水平顯著升高,TNF-a水平有所降低。 結(jié)論: 1、采用8倍量的
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