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文檔簡(jiǎn)介
1、目的:
本實(shí)驗(yàn)旨在研究c-jun在三氧化二砷(arsenic trioxide As2O3)促進(jìn)腺樣囊性癌細(xì)胞 ACC-2凋亡及抑制癌細(xì)胞增殖中的表達(dá)及意義,進(jìn)而為腺樣囊性癌(adenoid cystic carcinoma,ACC)治療的可行途徑提供線索。
方法:
(1)將經(jīng)過(guò)不同濃度As2O3培養(yǎng)的ACC-2細(xì)胞作為實(shí)驗(yàn)組,不含As2O3培養(yǎng)液的ACC-2細(xì)胞作為對(duì)照組,倒置顯微鏡觀察兩組細(xì)胞的形態(tài)變化
2、;
(2)用RT-PCR法檢測(cè)兩組ACC-2細(xì)胞c-jun基因在mRNA水平上的表達(dá)變化情況;
(3)免疫組化法觀察藥物作用前后Jun蛋白表達(dá)量的變化。
采用SPSS19.0統(tǒng)計(jì)軟件包處理、分析數(shù)據(jù),檢驗(yàn)水準(zhǔn)為a=0.05。
結(jié)果:
(1)顯微鏡下:實(shí)驗(yàn)組 ACC-2細(xì)胞生長(zhǎng)緩慢,細(xì)胞貼壁能力下降,變圓變小,隨著培養(yǎng)時(shí)間延長(zhǎng)及As2O3濃度增加,細(xì)胞逐漸出現(xiàn)脫落、壞死。
(2)
3、 RT-PCR:c-jun mRNA在對(duì)照組ACC-2細(xì)胞的表達(dá)量最高,而隨著As2O3作用濃度的增加和作用時(shí)間的延長(zhǎng),其表達(dá)量明顯下降,在6μmol/L作用48h時(shí)表達(dá)量最低,差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P=0.001);
(3)免疫組化檢測(cè):Jun蛋白表達(dá)于細(xì)胞核,胞漿不著色,胞核呈棕黃色或褐色,Jun蛋白在對(duì)照組ACC-2細(xì)胞中呈高表達(dá),As2O3作用于ACC-2細(xì)胞后,其表達(dá)量降低,差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P=0.008)。
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