多西環(huán)素對四種大鼠實驗性肺動脈高壓模型的影響.pdf

1、目的:建立四種大鼠實驗性肺動脈高壓模型，即低氧模型、野百合堿模型、高肺血流模型以及新生內(nèi)膜模型，觀察廣譜基質(zhì)金屬蛋白酶(MMPs)抑制劑多西環(huán)素對這幾種模型肺動脈高壓肺血管重構的影響，從而探討MMPs在肺動脈高壓肺血管重構中的作用，并了解這種作用在不同病理生理條件所致的肺血管重構中是否具有普遍意義。 方法:將成年健康雄性SD大鼠(350-400g)，隨機分為正常組(N)、低氧模型組(H)及其干預組(HD)、野百合堿模型組(M)及

2、其干預組(MD)、高肺血流模型組(P)及其干預組(PD)、新生內(nèi)膜模型組(PM)及其干預組(PMD)。高肺血流模型通過左肺切除建立，新生內(nèi)膜模型通過左肺切除加野百合堿注射建立。干預藥物多西環(huán)素(20mg/kg．d．灌胃)均于模型建立2天前開始給予直至實驗終止。4周后(新生內(nèi)膜模型為5周)觀察各組的平均肺動脈壓(mPAP)、右心指數(shù)即“右心室/左心室+室間膈”重量比；光鏡觀察肺小動脈中膜厚度百分比、、肺非肌性小動脈肌化程度、血管外膜膠原沉

3、積以及新生內(nèi)膜產(chǎn)生情況；觀察肺小血管管壁細胞增殖度和凋亡蛋白Caspase-3表達變化；免疫組化和實時熒光定量PCR(RT-PCR)檢測MMP-2，9以及組織抑制因子-1(TIMP-1)在肺組織中的表達情況；明膠酶譜法檢測肺組織勻漿中明膠酶活性的變化情況。 結(jié)果:①mPAP和右心指數(shù)，各模型組(H，M，P，PM)均高于正常組(N)和其相應的干預組(HD，MD，PD，PMD)，(P<0.01)。②肺小動脈管壁厚度百分比、肺非肌性小

4、動脈肌化程度、肺小血管管壁細胞增殖度和血管外膜膠原沉積4項指標，各模型組均高于正常組和其相應的干預組，(P<0.01)。③Caspase-3陽性表達各模型組均低于其相應的干預組，(P<0.01)。④除PM和PMD組外，其他組均未見新生內(nèi)膜形成。新生內(nèi)膜增殖度PM組高于PMD組，(P<0.01)。⑤免疫組化和RT-PCR對MMP-2，9在肺組織中的表達定量顯示各模型組均高于正常組(N)和其相應的干預組，(P<0.01)。肺組織勻漿中明膠酶

5、活性，各模型組均高于正常組(N)和其相應的干預組(P<0.01)。⑥免疫組化和RT-PCR對TIMP-1在肺組織中的表達定量顯示其變化趨勢與MMPs在肺組織的表達變化趨勢一致，差異有統(tǒng)計學意義，(P<0.01)。 結(jié)論:廣譜MMPs抑制劑多西環(huán)素能減輕4種模型的肺動脈高壓和肺血管重構，提示MMPs高表達可能在肺動脈高壓肺血管重構的形成過程中發(fā)揮重要作用。在4種不同病理生理條件下得到的結(jié)論一致，提示這種作用可能具有普遍意義。多西環(huán)