燃煤型氟中毒雌鼠卵巢細胞凋亡及機制研究.pdf

1、【目的】動態(tài)觀察燃煤型氟中毒誘導雌鼠卵巢細胞凋亡并探討其致卵巢細胞凋亡機制。
　　【方法】1.采用自由食用織金病區(qū)原煤加拌泥煤烘烤的玉米復制燃煤型氟中毒動物模型（對照組、中氟組、高氟組）；2.動態(tài)觀察雌鼠染氟期間牙齒的變化情況；3.采用離子選擇電極法、高溫灰化-氟離子選擇電極法測定雌鼠尿氟、骨氟含量；4.于不同時間段（60d、120d、180d）動情期處死雌鼠，分離卵巢。①稱重，計算卵巢的臟器系數(shù)。②電鏡下觀察卵巢組織亞微結構及顆

2、粒細胞凋亡情況。③用TUNEL技術檢測卵巢顆粒細胞凋亡細胞數(shù)。④采用比色法測定雌鼠新鮮卵巢組織中SOD、MDA的含量變化。⑤用免疫組化法檢測卵巢顆粒細胞凋亡相關蛋白Fas、Caspase-3的表達。
　　【結果】1.成功復制實驗動物模型。2.隨著染氟劑量增加以及染氟時間的延長，雌鼠氟斑牙癥狀逐漸加重。3.雌鼠尿氟、骨氟的含量隨著染氟劑量的增加以及染氟時間的延長而增加。4.各組別在不同染氟時間卵巢臟器系數(shù)比較均無統(tǒng)計學意義(P>0.

3、05)。5.染氟組的卵巢組織亞微結構產生變化，顆粒細胞出現(xiàn)凋亡。6.各對照組僅有少量的凋亡細胞，染氟組隨著染氟劑量的增加和時間的延長，凋亡細胞數(shù)明顯呈上升趨勢。7.在染氟時間相同的情況下，隨著染氟劑量的增加，SOD活性顯著性降低，MDA的含量顯著性升高；在染氟劑量相同的情況下，隨著染氟時間的延長，SOD含量和MDA含量的變化無統(tǒng)計學意義(P>0.05)。8.隨著染氟時間的延長，染氟組雌鼠卵巢組織Fas蛋白含量增加，各組兩兩比較均具有統(tǒng)計

4、學意義（P<0.05）。在染氟劑量相同的實驗中，中氟組各組兩兩比較均具有統(tǒng)計學意義（P<0.05）,其他組別比較無統(tǒng)計學意義。9、染氟組卵巢顆粒細胞Caspase-3蛋白表達量與對照組相比均升高，但在180d時高氟組卵巢顆粒細胞Caspase-3蛋白表達量比中氟組蛋白表達量減少。
　　【結論】1.氟中毒對卵巢生殖功能的毒性作用的強弱與染氟劑量、時間有關；2.氟可損害雌鼠自由基代謝和抗氧化系統(tǒng)功能，損害程度與染氟劑量關系密切，與染氟