卵巢上皮性癌組織中HGF、IGF-Ⅰ及MMP-2的表達(dá).pdf

1、卵巢癌(ovarian cancer)是婦科惡性腫瘤中死亡率最高的一類(lèi)腫瘤，各種年齡均可發(fā)病。其中上皮性卵巢腫瘤占原發(fā)性卵巢腫瘤的50％～70％，其惡性類(lèi)型占卵巢惡性腫瘤的85％～90％。因卵巢癌臨床早期無(wú)癥狀，并且缺乏有效的早期診斷方法，所以70％的病例在確診時(shí)已屬于中晚期，手術(shù)的效果不理想或已經(jīng)喪失手術(shù)時(shí)機(jī)；術(shù)后接受化療5年生存率也僅30％～40％。而侵襲、轉(zhuǎn)移及新生血管形成是卵巢癌最重要的生物學(xué)特征之一，也是卵巢癌患者治療失敗和死

2、亡的直接原因。
　　 肝細(xì)胞生長(zhǎng)因子(hepatocyte growth factor，HGF)又稱(chēng)擴(kuò)散因子(scatterfactor，SF)，是一種多效性生長(zhǎng)因子，由間質(zhì)細(xì)胞所分泌。最初僅被認(rèn)為是肝細(xì)胞增殖的有絲分裂原之一，以后逐漸發(fā)現(xiàn)它具有促進(jìn)腫瘤發(fā)展的多種功能，表現(xiàn)為刺激多種類(lèi)型細(xì)胞的增殖、分化、侵襲和形態(tài)形成等多功能生物學(xué)效應(yīng)，并參與胚胎發(fā)生、創(chuàng)傷愈合、器官再生、及炎癥等多種病理生理過(guò)程。研究發(fā)現(xiàn)，在許多腫瘤組織中?？?/p>

3、測(cè)得HGF的過(guò)度表達(dá)，通過(guò)破壞細(xì)胞間的連接，刺激癌細(xì)胞浸潤(rùn)，誘導(dǎo)腫瘤新生血管生長(zhǎng)，從而參與多種腫瘤細(xì)胞的惡性生物學(xué)行為。
　　 胰島素樣生長(zhǎng)因子(insulin-like growth factor，IGF)具有胰島素樣促代謝作用，具有極強(qiáng)的促有絲分裂作用，是許多正常和腫瘤細(xì)胞凋亡的抑制物。IGF-Ⅰ是IGF系統(tǒng)中的一類(lèi)多肽類(lèi)生長(zhǎng)因子，最初被稱(chēng)為促生長(zhǎng)因子(Sm-c)，大部分由肝臟產(chǎn)生，分布廣泛。具有促進(jìn)有絲分裂，刺激RNA和D

4、NA的合成而促進(jìn)細(xì)胞增殖和/或抑制細(xì)胞凋亡；誘導(dǎo)細(xì)胞內(nèi)原癌基因的表達(dá)，啟動(dòng)細(xì)胞增殖分裂過(guò)程，促進(jìn)癌細(xì)胞的生長(zhǎng)并增強(qiáng)惡性腫瘤的侵襲力。
　　 基質(zhì)金屬蛋白酶-2(matrix metalloproteinase-2，MMP-2)是Ⅳ型膠原酶的一種，以非活性形式由腫瘤組織產(chǎn)生，是腫瘤浸潤(rùn)和轉(zhuǎn)移的主要因素，能促進(jìn)腫瘤新生血管的形成；腫瘤細(xì)胞通過(guò)分泌MMP-2，從而降解腫瘤細(xì)胞周?chē)募?xì)胞外基質(zhì)和基底膜，增強(qiáng)腫瘤細(xì)胞的侵襲及轉(zhuǎn)移能力，影響

5、著腫瘤的生物學(xué)行為，同時(shí)腫瘤細(xì)胞分泌的MMP-2可以降解毛細(xì)血管內(nèi)皮層下的基底膜和細(xì)胞外基質(zhì)，使內(nèi)皮細(xì)胞向外遷移并增殖，最終形成新的血管和基底膜。
　　 目的
　　 本研究采用免疫組織化學(xué)SP法檢測(cè)正常卵巢組織、卵巢良性上皮性腫瘤組織和卵巢上皮性癌組織中HGF、IGF-Ⅰ及MMP-2蛋白的表達(dá)，分析三者與卵巢上皮性癌細(xì)胞生物學(xué)特性間的關(guān)系，探討其在卵巢癌發(fā)生發(fā)展中的作用。
　　 材料與方法
　　 1材料：

6、收集鄭州大學(xué)第三附屬醫(yī)院和河南省腫瘤醫(yī)院自2008年7月～2009年5月行手術(shù)切除的卵巢組織共110例，所有標(biāo)本都經(jīng)10％的中性福爾馬林固定，常規(guī)脫水，石蠟包埋。其中正常卵巢組織20例，卵巢良性上皮性腫瘤組織30例(其中漿液性乳頭狀囊腺瘤15例，黏液性乳頭狀囊腺瘤15例)，卵巢上皮性癌組織70例。卵巢上皮性癌患者年齡19.0～82.0(51.9±13.5)歲，均為初發(fā)病例，術(shù)前均未接受放、化療；組織學(xué)分級(jí)：G112例，G221例，G33

7、7例；FIGO分期：Ⅰ期10例，Ⅱ期14例，Ⅲ期43例，Ⅳ期3例；組織學(xué)分型：漿液性癌50例，粘液性癌20例；有淋巴轉(zhuǎn)移者21例，無(wú)淋巴轉(zhuǎn)移者49例。標(biāo)本均經(jīng)病理醫(yī)師證實(shí)。
　　 2實(shí)驗(yàn)方法：本研究采用免疫組織化學(xué)SP方法檢測(cè)HGF、IGF-Ⅰ及MMP-2在卵巢上皮性癌組織、卵巢良性上皮性腫瘤組織及正常卵巢組織中的表達(dá)，根據(jù)染色強(qiáng)度及陽(yáng)性細(xì)胞數(shù)量雙評(píng)分法半定量積分。HGF蛋白主要表達(dá)于卵巢癌組織間質(zhì)細(xì)胞及癌細(xì)胞的胞漿內(nèi)為棕黃色或

8、棕褐色顆粒，IGF-Ⅰ的陽(yáng)性染色細(xì)胞為細(xì)胞漿內(nèi)出現(xiàn)棕黃色顆粒，MMP-2以細(xì)胞膜或胞漿出現(xiàn)淡黃至棕黃色顆粒為陽(yáng)性。采用SPSS13.0軟件包進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析，采用x2檢驗(yàn)，相關(guān)性分析采用Spearman相關(guān)性檢驗(yàn)，以α=0.05為檢驗(yàn)水準(zhǔn)。
　　 結(jié)果：
　　 1免疫組織化學(xué)SP法檢測(cè)結(jié)果：HGF表達(dá)HGF在卵巢上皮性癌組織、卵巢良性上皮性腫瘤組織及正常卵巢組織中的表達(dá)率分別是65.7％、26.7％、15.0％(x2=23.

9、005，P＜0.05)，癌組織中與正常卵巢組織、良性卵巢腫瘤表達(dá)有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義；在卵巢上皮性癌組織中，HGF蛋白的陽(yáng)性表達(dá)在臨床分期Ⅰ-Ⅱ期和Ⅲ-Ⅳ期、有無(wú)淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移組織中的表達(dá)有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)；在不同年齡組、有無(wú)腹水及不同組織學(xué)分級(jí)差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05)。
　　 2免疫組織化學(xué)SP法檢測(cè)結(jié)果：IGF-Ⅰ表達(dá)在卵巢上皮性癌組織、卵巢良性上皮性腫瘤組織及正常卵巢組織中的表達(dá)率分別是77.4％、33.3％、0％(

10、x2=43.622，P＜0.05)，三組兩兩比較有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義；在卵巢上皮性癌組織中，IGF-Ⅰ蛋白的陽(yáng)性表達(dá)在臨床分期Ⅰ～Ⅱ期和Ⅲ～Ⅳ期、有無(wú)淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的組織中表達(dá)差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)；在不同年齡組、不同組織學(xué)分級(jí)及有無(wú)腹水的表達(dá)差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05)。
　　 3免疫組織化學(xué)SP法檢測(cè)結(jié)果：MMP-2表達(dá)在卵巢上皮性癌組織、卵巢良性上皮性腫瘤組織及正常卵巢組織中的表達(dá)率分別是71.4％、40.0％、0％(x

11、2=33.962，P＜0.05)，三組兩兩比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義；在卵巢上皮性癌組織中，MMP-2蛋白的陽(yáng)性表達(dá)在臨床分期Ⅰ～Ⅱ期和Ⅲ～Ⅳ期、有無(wú)淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的組織中表達(dá)差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)；在不同年齡組、不同組織學(xué)分級(jí)及有無(wú)腹水的表達(dá)差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05)。
　　 4卵巢上皮性癌組織中，HGF與IGF-Ⅰ蛋白的陽(yáng)性表達(dá)水平呈正相關(guān)(r=0.860，P＜0.05)；HGF與MMP-2蛋白的陽(yáng)性表達(dá)水平呈正相關(guān)(