ATP敏感性鉀通道對大鼠前脂肪細胞增殖分化影響及其機制.pdf

1、本研究分為二部分：
　　 第一部分：ATP敏感性鉀通道對大鼠前脂肪細胞增殖分化影響
　　 目的：探討ATP 敏感性鉀通道在大鼠前脂肪細胞增殖分化中作用。
　　 方法：逆轉(zhuǎn)錄PCR檢測大鼠腦組織、脂肪組織、前脂肪細胞和誘導(dǎo)5天獲得的脂肪細胞中ATP 敏感性鉀通道磺脲類受體mRNA（SURmRNA)亞型，實時定量PCR檢測前脂肪細胞和誘導(dǎo)5天獲得的脂肪細胞中SURmRNA表達；ATP 敏感性鉀通道阻滯劑格列本脲和激動

2、劑二氮嗪作用于前脂肪細胞，實時定量PCR檢測SURmRNA表達，MTT檢測前脂肪細胞增殖，流式細胞儀檢測細胞周期分布；油紅O 染色法檢測細胞內(nèi)脂質(zhì)含量，Image-Pro plus5.0軟件測量細胞直徑。
　　 結(jié)果：大鼠腦組織中有SUR1mRNA、SUR2mRNA表達，大鼠脂肪組織、前脂肪細胞和誘導(dǎo)5天獲得的脂肪細胞中均有SUR2mRNA表達，而無SUR1mRNA表達，且脂肪細胞中SUR2mRNA表達明顯高于前脂肪細胞；格列本

3、脲抑制前脂肪細胞SUR2mRNA表達，呈劑量依賴性地促進前脂肪細胞增殖，增加G2/M+S 期細胞百分率，增加細胞脂質(zhì)含量，使脂肪細胞直徑增大；二氮嗪在這些方面的作用與格列本脲相反。
　　 結(jié)論：ATP 敏感性鉀通道在前脂肪細胞增殖分化中可能起調(diào)節(jié)作用。
　　 第二部分：ATP敏感性鉀通道調(diào)節(jié)大鼠前脂肪細胞增殖分化機制研究
　　 目的：探索ATP 敏感性鉀通道調(diào)節(jié)大鼠前脂肪細胞增殖分化機制。
　　 方法：A

4、TP 敏感性鉀通道特異性激動劑（二氮嗪）、阻滯劑（格列本脲）作用于前脂肪細胞誘導(dǎo)分化5天后，逆轉(zhuǎn)錄PCR檢測瘦素mRNA表達及過氧化物酶體增殖物激活受體γ（PPAR γ）mRNA表達。二氮嗪、格列本脲作用于前脂肪細胞一天，Western blot檢測其細胞內(nèi)P21、P27 蛋白表達。
　　 結(jié)果：前脂肪細胞分化過程中，二氮嗪組瘦素mRNA表達明顯增加（p<0.05），格列本脲組瘦素mRNA表達明顯降低（p<0.05）；格列本脲組