匹羅卡品幼鼠致癇模型制作及GFAP、synapsinⅠ表達變化.pdf

1、中南大學碩士學位論文匹羅卡品幼鼠致癇模型制作及GFAP、synapsinⅠ表達變化姓名：魏超平申請學位級別：碩士專業(yè)：兒科學指導教師：尹飛20090501碩士學位論文中文摘要現(xiàn)今大多數(shù)癲癇動物實驗都以成年鼠為研究對象，少有模擬小兒癲癇的動物模型。研究發(fā)現(xiàn)，未發(fā)育成熟的大腦與成熟大腦在癲癇致病因素、發(fā)生發(fā)展、臨床和腦電圖(EEG)表現(xiàn)、對抗癲癇藥物反應以及預后上均有很大不同。本實驗中，我們以未成年鼠為研究對象，選用匹羅卡品致癇，研究模型鼠

2、海馬形態(tài)學改變；通過免疫組織化學和免疫印跡方法檢測GFAP、synapsinI在海馬各亞區(qū)動態(tài)表達，并探討其與發(fā)育期大鼠慢性癲癇的關(guān)系。第一部分匹羅卡品顳葉內(nèi)側(cè)癲癇模型的建立及致癇幼鼠海馬形態(tài)學改變目的建立一種簡單可靠、與人類癲癇發(fā)生發(fā)展特征相似的動物模型。方法取3周齡健康雄性SD大鼠165只，將其隨機分為生理鹽水對照組(30只)、氯化鋰一匹羅卡品實驗組(135只)。實驗組氯化鋰(127mg／kg)聯(lián)合匹羅卡品(50mg／kg)腹腔注射

3、，誘發(fā)大鼠出現(xiàn)癲癇持續(xù)狀態(tài)并持續(xù)90分鐘后予10％水合氯醛中止，再將存活致癇鼠隨機分為致癇后15小時、致癇后3周、致癇后8周三個亞組，每天逐只觀察存活鼠有無自發(fā)癇性發(fā)作。對照組給予等量生理鹽水腹腔注射，并隨機分為生理鹽水注射后15小時、3周、8周三個亞組。實驗組及對照組每亞組再分為兩部分，一部分灌注固定制備切片行尼氏染色、Timm染色，以及GFAP、synapsinI免疫組織化學染色，另一部分取大腦海馬組織行免疫印跡分析。結(jié)果1、實驗組

4、135只大鼠中941％成功誘發(fā)出現(xiàn)癲癇持續(xù)狀態(tài)，但死亡率高達688％。致癇后8周組大鼠中70％成年后出現(xiàn)了反復自發(fā)癇性發(fā)作和EEG上癇樣波發(fā)放。對照組大鼠行為及EEG表現(xiàn)無異常。2、致癇后15小時組大鼠海馬形態(tài)學未見有苔蘚纖維出芽及神經(jīng)元脫失的改變，但致癇后3周及8周組大鼠海馬均出現(xiàn)了明顯的苔蘚纖維出芽和神經(jīng)元脫失。苔蘚纖維出芽發(fā)生在CA3區(qū)和齒狀回內(nèi)分子層，且致癇后8周組與3周組相比有顯著性差異(PO01)。海馬CAl區(qū)、CA3區(qū)及齒