異煙肼耐藥相關基因及其功能分析.pdf_第1頁
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文檔簡介

1、該研究利用基因重組技術成功克隆了結核桿菌KatG基因,在此基礎上采用三步PCR法對KatG基因的6個位點進行了定向誘變.這6個位點均是在臨床菌株中篩查到的,其中2個為國外報道(S315T、W321Q),4個為國內首次報道(R418Q、P441L、A456S和A476V).后4個基因的意義尚未見深入的研究.此后,該課題又實現(xiàn)了這些重組蛋白的表達和純化.通過該部分工作建立了快速穩(wěn)定的誘變體系和重組KatG蛋白純化體系,為進一步研究點突變對K

2、atG蛋白結構和功能的影響,探討INH耐藥機制奠定基礎.在第二部分研究中,作者對前面所得野生型KatG和誘變型KatG重組蛋白的結構和功能進行了進一步的研究,測定了這些蛋白的過氧化氫-過氧化物酶活性,二聚體的形成情況和熒光光譜的變化.通過這些工作明確了6個突變點對KatG蛋白結構和功能的影響以及它們與INH耐藥的相關性,從而為明確耐藥結核桿菌基因譜打下基礎.在最后一部分研究中,作者以Haloarcula marismortui來源的過氧

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