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文檔簡介
1、紫外線輻射(ultraviolet radiation,UV)對正常人類皮膚的損傷包括日曬傷,光老化,免疫抑制及皮膚癌癥,其中皮膚的光損傷導致老化是近年來皮膚研究領域中的熱門課題之一。近年來新開展了光子嫩膚技術,臨床療效觀察發(fā)現(xiàn),強脈沖光(intense pulsed light,IPL)照射能使色素斑減淡/消除、毛細血管擴張改善/消除、細小皺紋消除,并且具有輕微的緊致皮膚作用等功效。因此本課題根據(jù)當前熱點問題,從細胞生物學層面研究強脈
2、沖光對人皮膚成纖維細胞(fibroblast,F(xiàn)B)的生長活力、細胞增殖能力以及細胞周期變化的影響并探討其可能的發(fā)生機制,為強脈沖光除皺嫩膚提供可能的理論依據(jù)。
我們?nèi)≌和そM織,分離培養(yǎng)原代人皮膚成纖維細胞,給以UVAI照射模擬光損傷。應用CCK-8(Cell Counting Kit-8)比色法、流式細胞儀(Flow Cytometry,F(xiàn)CM)分析技術和western blot技術,觀察皮膚成纖維細胞經(jīng)強脈沖光照射
3、后細胞的生長活力、細胞增殖能力以及細胞周期蛋白的表達變化。結果發(fā)現(xiàn):
?。?)體外實驗中,9J/cm2劑量的UVAI照射后第48h出現(xiàn)增殖變緩,有損傷作用。以9J/cm2的劑量UVAⅠ照射后48h時,即可觀察到細胞增殖活性出現(xiàn)了下降,隨后的各時間點內(nèi)與對照組相比,增殖活性明顯減小,P<0.05。臨床劑量IPL照射FB第72h之后,與對照組相比,細胞增殖活性明顯升高,P<0.01。FB經(jīng)UVAⅠ照射后再給IPL處理后,其增殖活性明
4、顯優(yōu)于單獨UVAⅠ處理組,P<0.05。
?。?)單獨UVAI或IPL照射48h后,G1期細胞比例下降,而S期細胞比例升高。UVAⅠ照射后再給以IPL處理,其S期高于單獨UVAⅠ照射組,同時G1期細胞低于UVAI單獨照射組,p<0.05。
?。?)單獨UVAI照射細胞48h后,細胞周期相關蛋白CyclinD1和CDK2的表達下降,而UVA+IPLⅠ照射后,CyclinD1和CDK2表達雖然低于對照組,但明顯較單獨UVAⅠ
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