血管過氧化物酶介導(dǎo)高血壓大鼠血管重構(gòu)及氯沙坦干預(yù)作用研究.pdf

1、目的:研究血管過氧化物酶(vascular peroxidas，VPO1)在高血壓大鼠(hypertensive rat)血管重構(gòu)(vascular remodeling，VR)中的作用，并探討氯沙坦(Losartan)抑制血管重構(gòu)是否涉及VPO1/MMPs途徑。
　　 方法:
　　 1.將36只12周齡雄性自發(fā)性高血壓大鼠(spontaneouslyhypertensive rats，SHR)分為3組:高血壓組(12只

2、)、低劑量Losartan組（15mg/kg.day12只）、高劑量Losartan組（30mg/kg.day12只），并將性別、周齡匹配的Wistar-Kyoto大鼠（12只）作為對(duì)照組(WKY組)，飼養(yǎng)8周。蘇木精-伊紅（HE）染色觀察大鼠胸主動(dòng)脈及腸系膜動(dòng)脈組織，用免疫組化方法檢測(cè)大鼠胸主動(dòng)脈及腸系膜動(dòng)脈中的VPO1表達(dá)。同時(shí)檢測(cè)過氧化氫(hydrogen peroxide，H2O2)濃度和過氧化氫酶(catalase，CAT)活

3、力。Western blot檢測(cè)大鼠動(dòng)脈組織MMP-2和MMP-9的蛋白表達(dá)。
　　 2.在培養(yǎng)大鼠血管平滑肌細(xì)胞(vascular smooth cell，VSMC)，予以AngⅡ10-6M和不同濃度的Losartan(10-5M、10-6 M)處理24小時(shí)，用Real time-PCR方法分別檢測(cè)VPO1、明膠酶A(MMP-2)、明膠酶B(MMP-9)的表達(dá)，western blot方法分別檢測(cè)VPO1、MMP-2、MMP-

4、9的蛋白含量，并檢測(cè)H2O2和次氯酸(hypochlorous acid，HOCl)濃度。
　　 3.建立VPO1表達(dá)沉默(VPO1 shRNA)干擾的大鼠VSMC，予以AngⅡ100 nM處理24小時(shí)，觀察VPO1 shRNA對(duì)H2O2、 HOCl水平及MMP-2和MMP-9表達(dá)的影響。
　　 結(jié)果:
　　 1.SHR大鼠主動(dòng)脈及腸系膜動(dòng)脈管壁增厚，中膜VSMC排列紊亂，單位面積細(xì)胞核數(shù)量增多，且重構(gòu)的血管組織

5、中VPO1、MMP-2和MMP-9蛋白表達(dá)增加，Losartan呈濃度依賴性逆轉(zhuǎn)血管重構(gòu)的同時(shí)，抑制VPO1、MMP-2和MMP-9蛋白表達(dá);SHR大鼠血漿中AngⅡ和H2O2表達(dá)增加，CAT活力下降。Losartan干預(yù)能降低H2O2表達(dá)，恢復(fù)CAT活力。
　　 2.AngⅡ(10-6 M)處理24小時(shí)可增加VSMC中VPO1、MMP-2和MMP-9的表達(dá)，同時(shí)升高H2O2和HOCl水平，Losartan呈濃度依賴性抑制Ang