SELDI-TOF-MS技術檢測腹腔熱灌注化療治療惡性腹水的機制.pdf

1、惡性腹水是腹腔惡性腫瘤晚期的常見的并發(fā)癥，是降低患者生活質量的主要因素之一，腹水所致的腹脹、腹痛嚴重影響著患者的生存質量，臨床治療困難。
　　 腹腔熱灌注化療（ Continuous Hyperthermic Intraperitoneal PerfusionChemotherapy，CHIPC）治療惡性腹水有明顯的優(yōu)勢，用于惡性腹水的治療已取得了很好的的成效，但目前對腹腔熱灌注化療治療惡性腹水的機制缺乏了解。
　　 本

2、課題擬應用SELDI-TOF-MS技術檢測胃癌并惡性腹水患者腹腔熱灌注化療治療前后血清、腹水中蛋白質圖譜的差異，分析胃癌并惡性腹水患者腹腔熱灌注化療治療前后血清、腹水中差異蛋白，并將差異蛋白放入匹茲堡大學生物醫(yī)學信息學系蛋白質組學實驗數(shù)據(jù)庫(EPO-KB)中，根據(jù)m/z 值對兩組均高表達的差異蛋白進行檢索，以探討CHIPC治療惡性腹水的分子生物學機制。
　　 材料和方法：
　　 1.病例和對照組選擇：
　　 廣州

3、醫(yī)學院附屬腫瘤醫(yī)院2008年10月至2009年3月收治的的胃癌并大量腹水患者8例，CHPPC治療后腹水全部消失，臨床療效評價為完全緩解。
　　 2.SELDI-TOF-MS檢測：
　　 經(jīng)過處理將血清、腹水樣本加到WCX2的芯片上，應用Protein Chip Software3.1和Biomarker Wizard(BMW)軟件，根據(jù)方差分析原理計算CHIPC 治療惡性腹水前后患者血清相同質荷比的蛋白質峰值表達差異的P

4、 值。根據(jù)P 值的大小可比較每一個質荷比峰在兩樣本中表達差異的顯著性程度，P 值越小說明該質荷比峰對區(qū)分兩類樣本越有意義。1) 血清中，灌注前/灌注后波峰強度之間的比較采用t 檢驗，P<0.05為差別有統(tǒng)計學意義。
　　 2) 腹水中，灌注前/灌注后波峰強度之間的比較采用t 檢驗，P<0.05為差別有統(tǒng)計學意義。
　　 3) 根據(jù)檢測得到兩組均高表達差異蛋白，通過匹茲堡大學生物醫(yī)學信息學系已建立蛋白質組學實驗數(shù)據(jù)庫(EP

5、O-KB)，可直接根據(jù)m/z完成對差異蛋白質的檢索。從而分析相關目標蛋白在CHPPC治療惡性腹水中的意義。
　　 結果：
　　 1) SELDI-TOF-MS 檢測共發(fā)現(xiàn)血清中有效蛋白峰83個；SELDI-TOF-MS 檢測共發(fā)現(xiàn)腹水中有效蛋白峰74個。
　　 2) SELDI-TOF-MS 檢測發(fā)現(xiàn)的血清中和腹水中的有效蛋白峰有一定的重疊性。
　　 3) CHIPC 治療惡性腹水患者血清中，灌注前8例對

6、灌注后8例，共發(fā)現(xiàn)P＜0.05的差異蛋白22個。
　　 4) CHIPC 治療惡性腹水患者腹水中，灌注前8例對灌注后8例，共發(fā)現(xiàn)P＜0.05差異蛋白20個。
　　 5) 血清中和腹水中，灌注前/灌注后差異表達的蛋白質譜有以下差異蛋白在兩組中均出現(xiàn)高表達，質/荷（m/z）值分別為：5582.36Da，3448.56Da，4418.04Da，7767.61Da，11661.53Da，3378.49Da和8604.72Da。<

7、br>　　 6) 在蛋白質組學實驗數(shù)據(jù)庫(EPO-KB)檢索上述分子量的差異蛋白，檢測出m/z值為7767.61Da的目標蛋白與血小板因子4（PF4）相吻合，其余6個差異蛋白則未能檢索到與之吻合的目標蛋白。
　　 結論：
　　 1) 與治療前相比，CHIPC治療后，惡性腹水患者的血清和腹水中相關的蛋白質表達水平均有顯著性的變化。
　　 2) 與治療前相比，CHIPC治療后，血清和腹水中部分差異蛋白峰的具有高度重