運(yùn)動(dòng)病評(píng)價(jià)指標(biāo)的驗(yàn)證和應(yīng)用.pdf

1、研究目的：
　　 運(yùn)動(dòng)病(motionsickness，MS)，即暈車病、暈船病、暈機(jī)病、航天病等，是由于前庭器官受到刺激而引起的中樞及自主神經(jīng)系統(tǒng)功能紊亂的一種疾病，主要臨床表現(xiàn)為頭暈、惡心、嘔吐、面色蒼白、出冷汗等，若治療不及時(shí)或治療不當(dāng)，會(huì)引起脫水和休克。運(yùn)動(dòng)病可發(fā)生于任何年齡，發(fā)病率較高，是一種具有遺傳傾向的疾病，但其確切的發(fā)病機(jī)制至今尚不清楚。建立完善的運(yùn)動(dòng)病評(píng)價(jià)系統(tǒng)及培育合適的運(yùn)動(dòng)病動(dòng)物模型是目前運(yùn)動(dòng)病研究所面臨的重

2、要問(wèn)題。我們前期研究發(fā)現(xiàn)以糞便和尿液為基礎(chǔ)的評(píng)價(jià)指標(biāo)，可用于評(píng)價(jià)大鼠和小鼠暈反應(yīng)的嚴(yán)重程度。但是，這個(gè)評(píng)價(jià)指標(biāo)對(duì)于評(píng)價(jià)如累加性、變異性和習(xí)服性等運(yùn)動(dòng)病的特征是否合適，以及應(yīng)用于篩選新型的抗運(yùn)動(dòng)病藥物是否有效、靈敏，還有待進(jìn)一步證實(shí)。因此本研究擬進(jìn)一步對(duì)小鼠給予不同模式的旋轉(zhuǎn)刺激、不同的旋轉(zhuǎn)刺激時(shí)間、破壞雙側(cè)迷路、進(jìn)行習(xí)服訓(xùn)練及給予不同種類的抗運(yùn)動(dòng)病藥物來(lái)進(jìn)行一系列驗(yàn)證，從而為抗運(yùn)動(dòng)病新藥研究中評(píng)價(jià)指標(biāo)的科學(xué)選擇提供實(shí)驗(yàn)依據(jù)。
　　

3、 研究方法：
　　 本課題通過(guò)下列實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證了運(yùn)動(dòng)病評(píng)價(jià)指標(biāo)，并進(jìn)行了抗運(yùn)動(dòng)病新藥的篩選。
　　 1.旋轉(zhuǎn)方式對(duì)暈反應(yīng)指數(shù)的影響
　　 旋轉(zhuǎn)方式有2種：?jiǎn)屋S旋轉(zhuǎn)和雙軸旋轉(zhuǎn)，在旋轉(zhuǎn)時(shí)間都是40min的條件下，比較這2種方式所致的暈反應(yīng)的嚴(yán)重程度。單軸旋轉(zhuǎn)，即繞著一個(gè)垂直于地球表面的垂直軸做水平勻速圓周運(yùn)動(dòng)，速度為360°/s；雙軸旋轉(zhuǎn)，除了繞上述的垂直軸旋轉(zhuǎn)外，還繞水平軸做上下滾動(dòng)，峰速度為360°/s，角加速度為

4、20°/s2。雙軸旋轉(zhuǎn)時(shí)，以20°/s2的角加速度，順時(shí)針旋轉(zhuǎn)，從0°/s加速達(dá)到360°/s后以同樣的角加速度減速到0°/s，然后逆時(shí)針旋轉(zhuǎn)，重復(fù)上述過(guò)程，如此循環(huán)，直至40min后停止旋轉(zhuǎn)。
　　 2.旋轉(zhuǎn)模式對(duì)暈反應(yīng)指數(shù)的影響
　　 根據(jù)實(shí)驗(yàn)儀器的設(shè)置，旋轉(zhuǎn)模式共有5組，在相同的旋轉(zhuǎn)時(shí)間40min的條件下，比較所誘發(fā)的暈反應(yīng)的嚴(yán)重程度。這5組模式是：峰速度為60°/s，角加速度為80°/s2；峰速度為120°/s，

5、角加速度為60°/s2；峰速度為180°/s，角加速度為60°/s2；峰速度為240°/s，角加速度為40°/s2：峰速度為360°/s，角加速度為20°/s2。
　　 3.旋轉(zhuǎn)時(shí)間對(duì)暈反應(yīng)指數(shù)的影響
　　 根據(jù)前面的實(shí)驗(yàn)結(jié)果，我們選擇了峰速度240°/s，角加速度40°/s2的旋轉(zhuǎn)模式，旋轉(zhuǎn)時(shí)間分別為10min，20min，40min，60min。旋轉(zhuǎn)時(shí)，以40°/s2的角加速度，順時(shí)針旋轉(zhuǎn)，從0°/s加速達(dá)到240°

6、/s后以同樣的角加速度減速到0°/s，然后逆時(shí)針旋轉(zhuǎn)，重復(fù)上述過(guò)程，整個(gè)過(guò)程歷時(shí)12s，如此循環(huán)。在4組不同的旋轉(zhuǎn)時(shí)間的條件下，比較旋轉(zhuǎn)時(shí)間長(zhǎng)短對(duì)暈反應(yīng)嚴(yán)重程度的影響。
　　 4.習(xí)服性對(duì)暈反應(yīng)指數(shù)的影響
　　 將14只小鼠每天下午2點(diǎn)給予旋轉(zhuǎn)刺激，旋轉(zhuǎn)模式為峰速度240°/s，角加速度40°/s2，時(shí)間為40min，連續(xù)15天，考察暈反應(yīng)指數(shù)的變化情況。
　　 5.雙側(cè)迷路破壞對(duì)暈反應(yīng)指數(shù)的影響
　　

7、對(duì)照組鼓室內(nèi)注射生理鹽水，給藥組用鼓室內(nèi)注射慶大霉素這種化學(xué)法破壞雙側(cè)迷路，考察雙側(cè)迷路破壞前后暈反應(yīng)指數(shù)的變化情況。
　　 6.抗運(yùn)動(dòng)病藥物對(duì)暈反應(yīng)指數(shù)的影響
　　 目前常用的治療運(yùn)動(dòng)病的藥物有4大類：抗膽堿藥、擬交感藥、抗組胺藥和鈣通道阻滯劑，我們分別選取了其中的代表藥物東莨菪堿、哌甲酯、苯海拉明和尼莫地平。腹腔注射給藥，比較運(yùn)動(dòng)病評(píng)價(jià)指標(biāo)與這些藥物藥效是否一致。
　　 7.運(yùn)動(dòng)病評(píng)價(jià)指標(biāo)的應(yīng)用
　　

8、 應(yīng)用運(yùn)動(dòng)病評(píng)價(jià)指標(biāo)，在7個(gè)抗運(yùn)動(dòng)病新藥中篩選出可能有效的藥物。結(jié)合自主活動(dòng)實(shí)驗(yàn)和爬桿實(shí)驗(yàn)這2個(gè)評(píng)價(jià)指標(biāo)，進(jìn)一步評(píng)價(jià)這些藥物的藥理學(xué)效應(yīng)。應(yīng)用運(yùn)動(dòng)病評(píng)價(jià)指標(biāo)評(píng)價(jià)腹腔給藥和側(cè)腦室給藥后東莨菪醇的藥效。
　　 結(jié)果：
　　 1.在相同旋轉(zhuǎn)時(shí)間的條件下，與單軸旋轉(zhuǎn)相比，雙軸旋轉(zhuǎn)所致小鼠的暈反應(yīng)指數(shù)較高(5.14±1.37vs3.06±1.07)。
　　 2.在相同旋轉(zhuǎn)時(shí)間的條件下，與其它旋轉(zhuǎn)模式相比，峰速度240°/s

9、，角加速度40°/s2所致小鼠的暈反應(yīng)指數(shù)最高(7.05±3.22)，明顯高于峰速度60°/s，角加速度80°/s2(2.66±1.09)，峰速度120°/s，角加速度60°/s2(3.12±1.61)以及峰速度180°/s，角加速度600/s2(4.01±2.05)。
　　 3.在相同旋轉(zhuǎn)模式的條件下，與其它旋轉(zhuǎn)時(shí)間相比，旋轉(zhuǎn)40min所致小鼠的暈反應(yīng)指數(shù)最高(4.85±1.26)，明顯高于旋轉(zhuǎn)10min(3.08±0.92)

10、。
　　 4.在連續(xù)旋轉(zhuǎn)15天的過(guò)程中，暈反應(yīng)指數(shù)先有輕度的升高，然后逐漸下降，從第11天開始，穩(wěn)定在4左右。
　　 5.HE染色的圖片顯示，給予慶大霉素的小鼠迷路破壞完全，造模成功。與給藥前相比，給予生理鹽水對(duì)照組的小鼠暈反應(yīng)指數(shù)，沒(méi)有顯著性差異(5.43±2.27vs4.67±1.92)；給予慶大霉素后，小鼠的暈反應(yīng)指數(shù)出現(xiàn)下降，并且有顯著性差異(2.00±0.98vs.4.9±1.48)。
　　 6.與給藥

11、前相比，溶劑對(duì)照組的暈反應(yīng)指數(shù)前后沒(méi)有差異；給予抗運(yùn)動(dòng)病藥物的4組，小鼠的暈反應(yīng)指數(shù)都出現(xiàn)了不同程度的下降，其中，東莨菪堿組下降的最多，下降的百分比為56.7％。
　　 7.運(yùn)用運(yùn)動(dòng)病評(píng)價(jià)指標(biāo)，從7個(gè)新型抗運(yùn)動(dòng)病藥物中篩選出sdfky5和sdfky6這2個(gè)可能有效的藥物。
　　 8.運(yùn)用自主活動(dòng)實(shí)驗(yàn)和爬桿實(shí)驗(yàn)，進(jìn)一步評(píng)價(jià)sdfky5和sdfky6這2個(gè)新型的抗運(yùn)動(dòng)病藥物的藥理學(xué)效應(yīng)，發(fā)現(xiàn)自主活動(dòng)實(shí)驗(yàn)這個(gè)評(píng)價(jià)指標(biāo)不夠靈敏和

12、準(zhǔn)確。這2個(gè)藥物組的爬桿時(shí)間與東莨菪堿組相比，出現(xiàn)了不同程度的升高；sdfky6組的爬桿時(shí)間長(zhǎng)于sdfky5組，但這2個(gè)藥物組間無(wú)顯著性差異。
　　 9.將sdfky6的2種同分異構(gòu)體拆分構(gòu)型進(jìn)行藥效評(píng)價(jià)，與空白對(duì)照組相比，它們的暈反應(yīng)指數(shù)有明顯的下降，下降的百分比為57.5％和56.9％。sdfky6-down組的爬桿時(shí)間沒(méi)有出現(xiàn)下降，反而有輕度的上升；sdfky6-up組的爬桿時(shí)間有顯著性下降，下降的百分比為81.5％。表明

13、，sdfky6-down的中樞抑制作用較小。
　　 10.與溶劑對(duì)照組相比，腹腔給藥后，東莨菪醇組的暈反應(yīng)指數(shù)沒(méi)有明顯改變；側(cè)腦室給藥后，暈反應(yīng)指數(shù)也沒(méi)有明顯改變。說(shuō)明東莨菪醇可能不具有抗運(yùn)動(dòng)病的作用。
　　 結(jié)論：
　　 1、暈反應(yīng)指數(shù)這個(gè)運(yùn)動(dòng)病評(píng)價(jià)指標(biāo)穩(wěn)定而且靈敏，可以很好的評(píng)價(jià)小鼠運(yùn)動(dòng)病的嚴(yán)重程度。
　　 2、結(jié)合爬桿實(shí)驗(yàn)，從7個(gè)新型抗運(yùn)動(dòng)病藥物中篩選出2個(gè)可能有效的藥物，并進(jìn)一步篩選出名為sdfk