玉米轉(zhuǎn)基因受體幼胚培養(yǎng)體系的建立與優(yōu)化.pdf

1、以玉米育種上常用的昌7—2、鄭58、浚9058、87—1、478、齊319-紅、9801、濟(jì)533、丹598、吉853共10個(gè)優(yōu)良玉米自交系為材料,進(jìn)行幼胚離體培養(yǎng)研究,通過(guò)愈傷組織的誘導(dǎo)、繼代、分化和植株再生試驗(yàn),調(diào)查其胚性愈傷組織誘導(dǎo)率、胚性愈傷組織克隆力、綠苗分化率等性狀,對(duì)影響玉米幼胚胚愈率和克隆力的因素進(jìn)行了相關(guān)分析,確定了玉米幼胚培養(yǎng)各階段的廣適培養(yǎng)基,篩選出了幼胚培養(yǎng)能力較強(qiáng)的玉米自交系及其相適應(yīng)的最適培養(yǎng)基,進(jìn)一步證明了

2、幼胚接種時(shí)的最佳長(zhǎng)度,從而建立了玉米轉(zhuǎn)基因受體幼胚培養(yǎng)體系。主要結(jié)果如下:
　　 1、通過(guò)N61、Ne2、N63、MS1、MS2、MS3、MB1、MB2、MB3九種誘導(dǎo)、繼代培養(yǎng)基和F1、F2、F3、F4四種分化培養(yǎng)基對(duì)10個(gè)玉米自交系幼胚愈傷組織誘導(dǎo)、繼代及分化影響的研究,認(rèn)為Ne2、MB2和F2分別是誘導(dǎo)、繼代和分化階段的廣適培養(yǎng)基。
　　 2、利用正交設(shè)計(jì)系統(tǒng)分析了2,4-D、L—pro和CH三種成分對(duì)愈傷組織克隆

3、力的影響,確定了三者的最佳配比組合為2,4-D(2.0mg/L)、L—pro(700 mg/L)和CH(500 mg/L),還提出了玉米幼胚愈傷組織繼代階段的優(yōu)化配比。
　　 3、通過(guò)對(duì)10個(gè)玉米自交系昌7—2、鄭58、浚9058、87—1、478、齊319-紅、9801、濟(jì)533、丹598、吉853各階段的誘導(dǎo)和培養(yǎng),以平均愈傷組織誘導(dǎo)率、胚性愈傷組織誘導(dǎo)率、愈傷組織克隆力和綠苗分化率為評(píng)價(jià)標(biāo)準(zhǔn),篩選出了幼胚培養(yǎng)能力較強(qiáng)的齊3

4、19-紅、87-l和9801三種基因型材料及其相配套的各階段最適培養(yǎng)基。
　　 4、從愈傷組織誘導(dǎo)率、胚性愈傷組織誘導(dǎo)率及愈傷組織生長(zhǎng)質(zhì)量等方面的綜合表現(xiàn)比較,得出較為合適的幼胚接種長(zhǎng)度是1.5～2.5mm,該長(zhǎng)度下的幼胚愈傷組織誘導(dǎo)能力強(qiáng),生長(zhǎng)快,質(zhì)地松脆,色澤鮮艷,胚性率高,有利于植株再生。
　　 5、在玉米幼胚培養(yǎng)的誘導(dǎo)、繼代和分化的每個(gè)階段,基因型之間的顯著差異普遍存在,且在分化階段更為明顯。與之相比,培養(yǎng)基成分