墊狀卷柏提取物的制備工藝及物質基礎研究.pdf

1、墊狀卷柏是民間傳統(tǒng)用藥，現代藥理學研究證明墊狀卷柏具有抗腫瘤、降血糖、抗菌抗病毒等多種藥理活性，15版《藥典》收載卷柏或墊狀卷柏為藥用品種。雙黃酮類化合物被認為是卷柏屬植物的主要藥效成分，其中穗花杉雙黃酮為墊狀卷柏提取物中含量較高的雙黃酮，具有降血糖、抗氧化、抗炎等多種生物學活性作用。本課題將以穗花杉雙黃酮含量為考察指標，對提取方法、富集工藝進行優(yōu)化，并對富集后的墊狀卷柏提取物進行定性分析及活性評價，同時構建卷柏藥材指紋圖譜，主要內容如

2、下:
　　(1)在單因素實驗基礎上以乙醇濃度、加醇倍量、提取時間、提取次數設計響應面，優(yōu)化醇提工藝。得到最優(yōu)提取條件:乙醇濃度71％、提取時間60min、提取次數3次、加醇倍量12倍，在此條件下，穗花杉雙黃酮提出量為17.28mg/g。以穗花杉雙黃酮含量為主要指標，采用大孔樹脂和二次沉淀兩種簡單的方法富集墊狀卷柏粗提物，并優(yōu)化工藝參數。大孔樹脂最優(yōu)參數:提取物濃度100mg/mL，上樣流速1.0mL/min，80％乙醇洗脫，洗脫流

3、速1.0mL/min，洗脫溶劑用量4倍柱體積，在此條件下提取物中穗花杉雙黃酮含量由原來的13.79％提高至52.46％;二次沉淀最優(yōu)參數:乙醇濃度30％，水沉溫度5℃，攪拌速度400rpm，加水速度3mL/min，該條件下提取物中穗花杉雙黃酮含量提高至47.92％。大孔樹脂富集工藝更適用于墊狀卷柏提取物中穗花杉雙黃酮的富集。
　　(2)利用HPLC-MSn技術結合化合物碎片信息及文獻資料，對富集后墊狀卷柏提取物進行定性鑒別，共鑒定

4、27個化合物，其中13個黃酮類成分、10個炔酚類成分以及4個其他類型的化合物，為有效地闡明墊狀卷柏提取物的藥效物質基礎提供參考價值。
　　(3)對富集后的墊狀卷柏提取物進行體外降糖活性和抗氧化活性試驗。結果表明墊狀卷柏提取物對α-葡萄糖苷酶具有較好的抑制作用，其IC50值分別為0.1978mg/mL(阿卡波糖的IC50值為2.6996mg/mL)。DPPH實驗表明墊狀卷柏提取物是一種慢速抗氧化劑，其IC50為184.8μg/mL(

5、VC的IC50值為12.84μg/mL)。
　　(4)對14批卷柏屬藥材進行含量測定并建立卷柏藥材指紋圖譜的共有模式，指定7個共有峰，其中卷柏藥材相似度均大于0.8，聚類分析和主成分分析均將樣品分為4類，其中2號峰（穗花杉雙黃酮）是卷柏藥材分類歸屬的關鍵成分，從產地分類歸屬看指紋圖譜技術結合化學計量學可為卷柏藥材的整體質量評價提供科學依據。
　　本課題對墊狀卷柏提取物做了較為系統(tǒng)的研究，為其在工業(yè)生產、藥效物質基礎、藥品開發(fā)