簡介：目的標本，觀察HBVDNA多位點基因變異，以探討酒精對HBVDNA基因變異的影響，為慢性乙型肝炎的臨床診斷和治療提供依據(jù)。方法選取45例慢性乙型肝炎患者為研究對象，其中飲酒史超過10年，酒精攝入量超過80GD的慢性乙肝患者為嗜酒組，共20例，無飲酒史的慢性乙肝患者為非嗜酒組，共25例。采用基因芯片技術(shù)，同時檢HBVDNA前C區(qū)1896及1814位點、BCP區(qū)176Z及1764位點、P區(qū)528及552位點的基因變異。結(jié)果嗜酒組與非嗜酒組在性別、年齡、基因型、輸血史、天門冬氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶AST、丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶ALT、血清HBEAG、臨床診斷比較差異均無統(tǒng)計學意義P005。嗜酒組在BCP區(qū)1762、1764位點的突變頻率明顯高于非嗜酒組P均005。結(jié)論酒精導(dǎo)致乙肝病毒BCP區(qū)1762及1764位點發(fā)生基因突變，BCP區(qū)基因變可促進HBV在人體內(nèi)的復(fù)制表達，使慢性肝炎患者病情加重并可能發(fā)生肝硬化、癌。酒精引起HBVBCP區(qū)基因突變是酒精促進HBV病毒復(fù)制和基因表達增強機制之一。本研究未發(fā)現(xiàn)HBV前C區(qū)1896及1814位點、P區(qū)528位點及552位點突頻率在嗜酒組與非嗜酒組具有統(tǒng)計學差異，可能系酒精對上述位點突變無影響病例數(shù)較少有關(guān)。

簡介：目的1設(shè)計、構(gòu)建攜帶SINGR199慢病毒重組體。2在細胞水平探討慢病毒重組體沉默NGR基因的效應(yīng)及最佳給藥劑量。3在動物模型水平探討慢病毒重組體沉默NGR基因?qū)Υ笫骃CI后神經(jīng)軸突再生和神經(jīng)功能的影響，為進一步應(yīng)用臨床試驗提供理論依據(jù)。方法1按照ELBASHIR等設(shè)計原則和SIRNA表達載體的要求，設(shè)計構(gòu)建NGR特異SINGR199慢病毒重組體，并進行酶切鑒定及基因測序；2體外培養(yǎng)大鼠原代皮層神經(jīng)元細胞，1周后進行不同滴度的重組慢病毒轉(zhuǎn)染，通過熒光鏡觀察重組體轉(zhuǎn)染情況，確定最適轉(zhuǎn)染的慢病毒重組體MOI值，并應(yīng)用實時熒光定量PCR檢測內(nèi)源性NGA基因沉默效果；3采用改良ALLEN’S打擊法建立大鼠中度脊髓損傷模型；436只成年雌性SD大鼠隨機分為生理鹽水組、空慢病毒組、重組慢病毒組各12只，脊髓損傷后1周行皮層體感運動區(qū)多點注射給藥，給藥8D后應(yīng)用實時熒光定量PCR檢測注謝區(qū)皮層神經(jīng)元細胞NGRMRNA表達情況，免疫組化觀察NGR蛋白表達狀況。536只成年雌性SD大鼠隨機分為生鹽水組、空慢病毒組、重組慢病毒組各12只，脊髓損傷后1周行皮層體感運動區(qū)多點注射，在脊髓損傷后每周，對大鼠的神經(jīng)功能進行行為學評分；給藥后6周行皮層體感運動區(qū)注射神經(jīng)示蹤劑，給藥后8周通過組織學觀察脊髓損傷神經(jīng)修復(fù)情況。結(jié)果1構(gòu)建的NGR特異性SINGR199慢病毒重組體經(jīng)酶切鑒定、基因測序儀測序，結(jié)果與設(shè)計序列完全相符，目的基因序列準確無誤，慢病毒重組體構(gòu)建成功。2慢病毒重組體實現(xiàn)大鼠原代皮層神經(jīng)元轉(zhuǎn)染，96H后神經(jīng)細胞開始表達綠色熒光，146H后綠色熒光最強，適合高效感染的MOI值為3；轉(zhuǎn)染192H后收集細胞進行實時熒光定量PCR檢測，結(jié)果顯示目的基因抑制效率為61％，與對照組比較差異有統(tǒng)計學意義P005。組織學和神經(jīng)纖維染色檢查結(jié)果重組慢病毒組損傷部位形成的空洞比較少，可觀察到神經(jīng)纖維通過、有更多髓鞘組織形成及膠質(zhì)細胞增生；神經(jīng)示蹤觀察重組慢病毒組有少量的軸突生長通過損傷區(qū)域。結(jié)論本研究成功構(gòu)建了NGR特異性SINGR199慢病毒重組體，重組體能夠在大鼠體外培養(yǎng)的原代皮層神經(jīng)元和體內(nèi)脊髓損傷模型中實現(xiàn)RNA干擾，較長時間下調(diào)神經(jīng)元的內(nèi)源性NGRMRNA表達，并在一定程度上促進脊髓神經(jīng)軸突再生和大鼠后肢運動功能的恢復(fù)。我們認為慢病毒載體介導(dǎo)的RNA干擾可能成為脊髓損傷治療的有效手段之一，其可能的作用機制為慢病毒重組體能穩(wěn)定地在皮層神經(jīng)元中表達RNA干擾，長期誘導(dǎo)NGR基因沉默，從而減少髓磷脂相關(guān)抑制因子NOGO、MAG和OMGP與NGR結(jié)合，最終能夠促進脊髓損傷區(qū)神經(jīng)軸突的再生。

簡介：該研究以白紋伊蚊和致倦庫蚊為研究對象通過登革2型病毒與兩種蚊蟲的中腸、中腸刷狀緣膜BRUSHBDERMEMBRANEFRACTIONBBMF的結(jié)合實驗以及使用VOPBA實驗方法鑒定登革2型病毒在兩種蚊蟲中腸上受體對病毒受體在蚊蟲對病毒中腸感染屏障中的作用進行探討研究結(jié)果表明白紋伊蚊與致倦庫蚊的中腸在解剖出體外的情況下與登革2型病毒的結(jié)合行為特點沒有顯著性差異蚊蟲在中腸水平上粘附病毒不是蚊蟲中腸感染屏障的主要因素但是白紋伊蚊與致倦庫蚊BBMF與登革2型病毒的結(jié)合有著顯著性的差異而且在白紋伊蚊中腸上鑒定出分子量約為35KDA的受體蛋白可以與登革2型病毒結(jié)合而在致倦庫蚊中腸上不能鑒定出與登革2型病毒結(jié)合的受體蛋白成分提示中腸病毒受體應(yīng)是蚊蟲BBMF與病毒結(jié)合特性及蚊蟲中腸對病毒中腸感染屏障的主要因素另外該研究還對C636細胞上登革病毒的受體進行VOPBA與免疫沉淀研究結(jié)果顯示登革病毒在C636細胞上的受體是一分子量約為35KDA的非糖蛋白而且登革病毒四個血清型在C636細胞上受體沒有血清型間差異

簡介：背景和目的維持性血液透析治療是腎臟替代療法中最早與應(yīng)用最廣泛的療法越來越多的終末期腎病患者通過血液透析獲得了新生。患者的生存期雖然延長但血液透析治療還不能完全替代腎臟的生理功能也不能阻止原有疾病的惡化且難以改變由于腎衰竭而引發(fā)的多臟器損害進展因此死亡的陰影始終籠罩著患者。血液透析本身也是一個痛苦的過程每周需多次用粗大的針頭穿刺血管帶來的肉體痛苦每次需靜臥45小時接受透析時的孤獨苦悶及無奈透析過程中可能出現(xiàn)的一些不適也常使患者感到恐懼和絕望。患者因病不能正常工作與外界接觸減少對家庭所承擔的責任明顯減少導(dǎo)致患者家庭關(guān)系淡漠社會活動空間減少使其自感社會價值降低和喪失獲得社會支持的機會下降。同時透析耗資巨大給患者及其家庭帶來難以承受的經(jīng)濟負擔使其感到自己的生活依賴于自己無法控制的因素。導(dǎo)致患者出現(xiàn)焦慮、恐懼、抑郁、無價值感、無助感等心理障礙以上因素嚴重影響患者的心理狀況、生活質(zhì)量及認知功能。本研究主要探討血透患者的心理狀況、生活質(zhì)量、認知功能以及可能相關(guān)的影響因素為提高患者的心理健康水平改善患者的生活質(zhì)量和認知功能提供有關(guān)的科學依據(jù)。方法研究對象分兩組血透組維持性血透患者64例對照組正常對照組65例。使用自制的一般情況問卷、MMSE、SAS、SDS、SF36進行評定同時行血常規(guī)、生化常規(guī)及甲狀旁腺激素等檢查。結(jié)果1血透組SAS、SDS總分高于正常人群HD組中抑郁癥患者體重較無抑郁者明顯下降HD組中單身患者出現(xiàn)焦慮癥者較有配偶者明顯增加女性、經(jīng)濟狀況差、居住在農(nóng)村的患者抑郁癥、焦慮癥的發(fā)生率較高。SDS總分與血紅蛋白、血肌酐呈負相關(guān)SAS總分與血肌酐呈負相關(guān)2HD組的SF36總均分及PF、RP、BP、GH、VT、SF、RE、MH、PCS及MCS顯著低于正常人群體重高的患者生活質(zhì)量較體重低者高合并焦慮、抑郁的患者生活質(zhì)量差生活質(zhì)量與血肌酐呈正相關(guān)與合并癥數(shù)、SDS、SAS總分呈負相關(guān)3HD組的MMSE評分低于正常組注意力和計算力、視空間能力與正常組有顯著差異MMSE總分與教育程度、精力、情感職能、PTH、血肌酐水平呈正相關(guān)與患者女性、無業(yè)、年齡、糖尿病、合并癥數(shù)、SDS總分呈負相關(guān)與患者婚姻狀況、血清白蛋白、血紅蛋白濃度、每周透析時間及KTV均無相關(guān)性。結(jié)論體重低、單身、血肌酐低、血紅蛋白低、SAS、SDS分值高對血透患者心理狀況影響較大心理因素和透析治療本身影響HD患者的生活質(zhì)量。高齡、糖尿病、教育程度低、情感職能及精力降低與患者認知功能減退密切相關(guān)。

簡介：碩士專業(yè)學位論文論文題目不同檢測方法在兒童急性下呼吸道人博卡病毒感染診斷中的應(yīng)用研究生姓名李玲指導(dǎo)教師姓名季偉專業(yè)名稱兒科學研究方向小兒呼吸論文提交日期2014年4月

簡介：蘇州大學學位論文獨創(chuàng)性聲明本人鄭重聲明所提交的學位論文是本人在導(dǎo)師的指導(dǎo)下，獨立進行研究工作所取得的成果。除文中已經(jīng)注明引用的內(nèi)容外，本論文不含其他個人或集體已經(jīng)發(fā)表或撰寫過的研究成果，也不含為獲得蘇州大學或其它教育機構(gòu)的學位證書而使用過的材料。對本文的研究作出重要貢獻的個人和集體，均己在文中以明確方式標明。．本人承擔本聲明的法律責任。論文作者簽名；日期礁P，乙型肝炎病毒相關(guān)性肝細胞癌中乙肝病毒BCP區(qū)A1762T／G1764A雙突變對X蛋白表達的影響中文摘要乙型肝炎病毒相關(guān)性肝細胞癌中乙肝病毒BCP區(qū)A1762T／G1764A雙突變對X蛋白表達的影響中文摘要【目的】構(gòu)建乙型肝炎病毒HBV核心啟動子區(qū)BCP1762／1764雙突變株的重組質(zhì)粒。檢測HBV相關(guān)性肝細胞癌HCC病人肝癌組織中BCP區(qū)A1762T／G1764A雙突變和乙型肝炎病毒X蛋白HBX的表達，分析此雙突變對HBX表達的影響，探討其對HCC發(fā)生、發(fā)展的關(guān)系及意義?！痉椒ā?利用已有1．5拷貝HBV野生型全基因組序列質(zhì)粒PHBVL．5，C型為模板，采用分子克隆、大引物定點突變方法構(gòu)建BCP區(qū)A1762T／G1764A雙突變重組質(zhì)粒。2將野生株重組質(zhì)粒和雙突變重組質(zhì)粒分別轉(zhuǎn)染到HEPG2．0細胞，測定其細胞培養(yǎng)液乙肝表面抗原HBSAG水平來確定雙突變質(zhì)粒的蛋白表達能力。3以野生株重組質(zhì)粒和雙突變重組質(zhì)粒基因序列設(shè)計特異性TAQMANMGB探針。4采用特異性探針實時熒光定量PCRPSRTPCR方法準確檢測樣本雙突變。5采用蛋白質(zhì)免疫印跡法WESTERN_BLOT檢測重組質(zhì)粒轉(zhuǎn)染后的HEPG2．0細胞和乙肝相關(guān)性肝細胞癌患者肝癌組織的HBX表達。6統(tǒng)計學分析采用SPSSL6．0統(tǒng)計學軟件處理，計量資料采用F檢驗、，檢驗，計數(shù)資料采用X2檢驗和FISHER確切概率法?！窘Y(jié)果】1成功構(gòu)建BCP區(qū)A1762T／G1764A雙突變重組質(zhì)粒。2成功制作用于同時檢測HBVDNA和雙突變拷貝量的TAQMANMGB探針。3成功使用PSRTPCR方法快速、特異、準確檢測乙肝病毒HBVBCP區(qū)A1762T／G1764A雙突變。4體外實驗顯示，轉(zhuǎn)染具有BCP區(qū)A1762T／G1764A雙突變重組質(zhì)粒的HEPG2．0一M細胞株HBX表達水平高于轉(zhuǎn)染野生型重組質(zhì)粒的HEPG2．0一W細胞株86．67％26／30礦S36．67％11／30，X15．864，仄0．001。5臨床實驗顯示，具有BCP區(qū)A1762T／G1764A雙突變的肝癌細胞HBX表達水平高于無此雙突變的肝癌細胞65．31％32／49YS36．84％

簡介：點擊查看更多甲型肝炎病毒P1B、P2A、P3AB和P3D蛋白在原核系統(tǒng)中的表達和抗原活性的分析.pdf精彩內(nèi)容。

簡介：目的探討在綜合醫(yī)院門診求診的無癥狀乙肝病毒攜帶者心理健康狀況與影響因素、應(yīng)對方式特點與影響因素及其二者之間的相關(guān)關(guān)系。方法于2007年1月～2007年7月期間應(yīng)用自編一般情況問卷、癥狀自評量表SCL90和計劃編制的“應(yīng)對方式問卷”對300例傳染科門診就診的攜帶乙肝病毒的患者進行調(diào)查。其中應(yīng)對方式問卷包括6個分量表即解決問題、合理化、求助、自責、幻想、退避等；癥狀自評量表包括軀體化、強迫癥狀、人際關(guān)系敏感、抑郁、焦慮、敵對、恐怖、偏執(zhí)及精神病性9個因子并按照中國常模結(jié)果的劃分標準劃分為輕、中、重三個等級。結(jié)果1、SCL90結(jié)果顯示SCL90評分總分為14924±4608有輕度心理問題總分≥160分41名137％有中度心理問題總分≥200分25名83％有重度心理問題總分≥240分12名4％心理問題的總檢出率為26％?；颊吒饕蜃泳置黠@高于全國常模除人際關(guān)系敏感和偏執(zhí)外其余各因子比較均有統(tǒng)計學差異。2、不同性別、年齡、婚姻、文化層次、職業(yè)、患者來源、醫(yī)療費用支付方式、病程、家人感染HBV情況等群體內(nèi)比較顯示SCL90總分、總均分和部分因子分有差異其中自費者、農(nóng)民、已婚者、20～39歲年齡段、家居農(nóng)村、病程15年以上患者的心理健康狀況較差。在影響SCL90總分的因素中文化程度、病程、家人感染HBV情況和患者來源四個因素對患者心理健康狀況的影響最大。3、患者最多選擇的應(yīng)對方式是解決問題其后依次是求助、幻想、退避、合理化和自責。男性患者較女性更容易選擇解決問題的應(yīng)對方式其中農(nóng)民、已婚、小學文化者、年齡在40歲以上患者的消極應(yīng)對方式較為明顯。4、SCL90各因子分與解決問題呈現(xiàn)顯著負相關(guān)與求助呈負相關(guān)；SCL90各因子與退避、自責、幻想、合理化均呈正相關(guān)差異有統(tǒng)計學意義。其中自責、解決問題是兩個影響心理健康狀況最主要的應(yīng)對方式。結(jié)論心理健康狀況較差在缺乏有效藥物治療的現(xiàn)狀下心理干預(yù)顯得尤為重要而在進行心理治療護理過程中應(yīng)加強應(yīng)對技巧的指導(dǎo)幫助他們學會運用成熟的應(yīng)對方式從而提高患者的生活質(zhì)量。

簡介：中南大學博士學位論文桿狀病毒作為椎間盤退變基因治療載體的實驗研究姓名劉小云申請學位級別博士專業(yè)外科學（骨科）指導(dǎo)教師李康華20050401在細胞中的表達水平。5取5例椎間盤突出癥患者的手術(shù)標本均為THOMPSONⅡI級進行髓核細胞的分離和培養(yǎng)，分3組進行處理第一組。L采用AC／CMV／SOX9進行轉(zhuǎn)染；第二組采用AC／CMV／GFP進行轉(zhuǎn)染；第三組空白對照組。利用免疫組化方法檢測離體培養(yǎng)的人椎間盤細胞中SOX9的表達水平和II型膠原的含量。取6只新西蘭大白兔，利用纖維環(huán)損傷法進行腰椎間盤退變的造模，分別對每只兔的每2個腰椎間盤進行同一種處理①注射PBSL12、L23②注射AC／CMV／GFPL34、L45③注射AC／CMV／SOX9L56、L67。5周后，普通光鏡下觀察兔椎間盤髓核細胞的表型，同時采用免疫組化的方法半定量檢測II型膠原的含量。結(jié)果1幼年兔的髓核細胞呈圓形，簇狀分布，細胞簇的密度為每個高倍視野14943個，其直徑為266167岫，細胞內(nèi)含有大量空泡狀的包含體。膠原纖維排列整齊，粗細均一，而成年兔的髓核細胞呈圓形或類圓形，細胞簇小或呈單個散在分布，細胞簇的密度為每個高倍視野8024個，其直徑為9442M，細胞中包含體數(shù)目少且不含大的包含體。膠原纖維出現(xiàn)較多的交聯(lián)，排列不整齊。2AC／CMV／GFP能有效轉(zhuǎn)染兔髓核細胞且無細胞毒性，最佳轉(zhuǎn)染濃度為200MOI，其轉(zhuǎn)染率高達87％。于轉(zhuǎn)染后的48小時，外源性GFP基因在離體培養(yǎng)的髓核細胞中的表達水平達到高峰，然后逐漸降低并持續(xù)穩(wěn)定在一個較低的表達平臺期。AC／CMV／GFP轉(zhuǎn)染兔椎間盤髓核組織的第7天，GFP表達最強，然后逐漸降低，第13天雖然有所降低，但差異無顯著性，P005第20和28天，其表達明顯降低PO05。轉(zhuǎn)染后，兔未出現(xiàn)任何異常反應(yīng)，髓核組織的病理切片觀察未發(fā)現(xiàn)炎性細胞侵潤，肉芽增生和纖維Ⅱ

簡介：目的體外構(gòu)建HSV1UL43真核表達載體利用生物信息學分析結(jié)果在體外對其表達的蛋白質(zhì)的功能進行初步研究為探究UL43編碼蛋白質(zhì)與藥物作用的靶點打下基礎(chǔ)。方法1利用生物信息學DNASTAR軟件PROTPARA軟件SOPMA程序ESYPRED3D程序BPNUAPNAGOYAUACJPSOSUIMENDELIMPACATSATDASDASHTML等網(wǎng)站或程序?qū)SV1UL43遺傳進化樹和UL43P結(jié)構(gòu)和功能進行預(yù)測和分析。2利用基因工程原理方法構(gòu)建HSV1UL43用于體外表達的T克隆載體和真核表達載體。3構(gòu)建HSV1膜融合過程中必要的四種基本糖蛋白GBGDGHGLT克隆載體以及真核表達載體。利用脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染效應(yīng)細胞細胞免疫酶聯(lián)分析體外分析UL43P在細胞到細胞膜融合過程中的作用。結(jié)果1HSV1UL43基因存在于Α和Γ類皰疹病毒中并與猴類同源性較高與同為人類皰疹病毒的HHV3及HHV8同源性較低。但結(jié)構(gòu)顯示PRVUL43同源性與HSV1較高。2HSV1UL43P中磷酸化位點較為豐富。UL43P跨膜結(jié)構(gòu)綜合預(yù)測為8跨膜與PRVUL43P相類似。3體外構(gòu)建的克隆載體和真核表達載體經(jīng)測序后其序列與實際情況相符。HSV1UL43P分子量為34KDA。4細胞免疫酶聯(lián)反應(yīng)顯示UL43P有抑制膜融合的作用其效果呈劑量依賴性。結(jié)論作為單純皰疹病毒編碼的跨膜蛋白HSV1UL43P與HSV1UL20P等非糖蛋白類似在細胞到細胞膜融合過程中發(fā)揮著“剎車員”的作用具有抑制膜融合的效果。

簡介：Y305{乏0分類號耵43．1單位代碼10159學號200340157中回鏨種夫拳碩士學位論文具有研究生畢業(yè)同等學力申請學位人員題目血漿同型半胱氨酸、葉酸及維生素B12水平與血管性認知障礙的關(guān)系申請人推薦人RELATIONSHIPBETWEENPLASMAHOMOCYSTEINE，F(xiàn)OLACINANDVITAMINB12LEVELSINV8SELLLARCOGNITIVEIM一●、PALRMENT吳楠張朝東學科專業(yè)疊絲疸堂論文課題起止時間呈堂生I旦二至堂主堡旦論文完成時間至堂生羔旦一一一一??一{中文論著摘要I血漿同型半胱氨酸、葉酸及維生素B12水平與血管性認知障礙的關(guān)系目的癡呆影響約7％的65歲以上的普通人群和30％80歲以上的人群。在老年期癡呆的研究中，血管性癡呆VASCULARDEMENTIA，VAD和阿爾茨海默病ALZHEIMERDISEASE，AD是最為常見的兩種類型。血管性認知障礙VASCULARCOGNITIVEIMPAIRMENT，VCU按嚴重程度和臨床特點分為如下亞型非癡呆型血管性認知障礙VASCULARCOGNITIVEIMPAIRMENTNODEMENTIA，VCIND、血管性癡呆和混合性癡呆MIXEDAD／VAD。VCI這一概念包括了所有與血管因素有關(guān)的認知改變，涵蓋了血管性認知損害從輕到重的整個發(fā)病過程，是對血管性癡呆這一概念的擴展和完善，它強調(diào)早期發(fā)現(xiàn)和早期預(yù)防，具有實際的臨床意義。近年來的研究已經(jīng)證實高同型半胱氨酸HOMOCYSTEINE，HCY血癥與老年期癡呆的發(fā)生關(guān)系密切，關(guān)于同型半胱氨酸與認知障礙關(guān)系的研究還剛剛起步，本課題旨在研究血漿同型半胱氨酸HCY水平與血管性認知障礙中VCIND、VAD兩亞型的關(guān)系。對象與方法1．研究對象1VCIND組22例，其中男性16例、女性6例，平均年齡72．91±4．29歲，平均受教育年限9．40±2．59年。入組條件①有腦血管病危險因素或腦血管病的存在；②認知功能損害呈波動性進展；③記憶力保留或較少損害，注意和執(zhí)行功能EXECUTIVEFUNCTION，EF受損較重，“1007”檢查注意力，畫鐘測驗檢查執(zhí)行功能二項之和6分為人組標準；④腦血管病和．1．

簡介：南京醫(yī)科大學博士學位論文EB病毒潛伏膜蛋白2A蛋白負載樹突狀細胞激發(fā)特異性CTL的研究姓名陳云申請學位級別博士專業(yè)免疫學指導(dǎo)教師姚堃20070420南京醫(yī)科大學博學位論文FCMFITCHEKⅢ沖3HTDR礤NIL4LCLLDHLⅣⅢ2A瑚C～MRNPCODORFPBMCPCRPFURPMRRPCRSITNFTAEFLOWCYTOME蚵FLUORESCEINISOTHIOCYANATEHUMANEMBRYONALKIDNEYHORSEMDISHPEROXIDASE’HTRITIATEDMYMIDINEINTERFERONINTERLEUKIN4LYMPHOBLASTOIDCELLLINELACTATEDEHYDROGENASELATENTMEMBRANEPROTEIN2AMAJORHISTOCOMPATIBILITYCOMPLEXMIXEDLYMPHOCYTEREACTIONNASOPHARYNGEALCARCINOMAOPTICALDENSTYOPENREADINGFLAMEPERIPHERALBLOODMONONUCLEARCELLPOLYMERASECHAINREACTIONPLAQUEFORMINGUNITROTATIONPERMINUTEREVERSETRANSCRIPTPOLYMERASECHAINRACTIONSTIRNULATIONINDEXTUMORNECROSISFACTOR強S／ACETATE／EDTABUFFER4流式細胞術(shù)異硫氰酸熒光素人胚腎臟辣根過氧化物酶3H標記胸腺嘧啶核苷酸干擾素’白細胞介素4淋巴母細胞樣細胞系乳酸脫氫酶潛伏膜蛋白2A主要組織相容性復(fù)合體混合淋巴細胞反應(yīng)鼻咽癌光密度開放閱讀框外周血單個核細胞多聚酶鏈式反應(yīng)空斑形成單位每分鐘轉(zhuǎn)速逆轉(zhuǎn)錄PCR刺激指數(shù)腫瘤壞死因子TIIS／醋踵盯EDTA緩沖液

簡介：柯薩奇病毒COXSACKIEVIRUS，CV是一種腸道病毒ENTEROVIRUS，EV，分為A和B兩類血清型，B組有6型病毒?？滤_奇病毒B組可引起呼吸道感染、腹瀉、腦膜炎、心肌炎、新生兒嚴重感染等，尤其是病毒性心肌炎VIRALMYOCARDITIS，VMC最常見的原因。病毒性心肌炎也可由其他腸道病毒引起。目前對病毒性心肌炎的臨床診斷，主要依靠臨床癥狀及常規(guī)生化檢查和心電圖，但是由于病毒性心肌炎發(fā)病初期的癥狀不典型，往往出現(xiàn)臨床癥狀時已經(jīng)累及心肌，引起心肌不可逆的損傷，造成嚴重后果。雖然血清學方法已廣泛應(yīng)用于診斷病毒感染，但無法明確診斷感染病毒的種類。本研究通過對柯薩奇病毒B1，B2，B3及其他腸道病毒保守區(qū)基因序列進行分析，分別設(shè)計高度特異性的引物與TAQMAN探針，建立了四重熒光定量RRTPCR，采用一步法可同時檢測COXB1、COXB2、COXB3以及其他腸道病毒。本研究分二部分第一部分為四重熒光定量RRTPCR法檢測柯薩奇病毒B1、B2、B3及其他腸道病毒方法的建立第二部分為四重熒光定量RRTPCR法的臨床應(yīng)用。第一部分四重熒光定量RRTPCR法檢測柯薩奇病毒B1、B2、B3及其他腸道病毒方法的建立1方法1從美國的NCBI基因庫下載了涵蓋國內(nèi)外COXB1、COXB2、COXB3以及腸道病毒的多條基因序列。利用DNAMAN軟件對其進行了同源性比較，確定以上病毒基因組的保守區(qū)。使用PRIMEREXPRESS30軟件在其保守區(qū)設(shè)計高度特異性的引物與TAQMAN探針，引物和探針序列均通過BLAST驗證。2優(yōu)化反應(yīng)體系，利用COXB1、COXB2、COXB3核酸片段和輪狀病毒、諾如病毒、札如病毒、腺病毒、EV71、COXA16等分離株評價該法的特異性，對已標定拷貝數(shù)的標準品（相應(yīng)質(zhì)粒）進行稀釋，平行進行熒光定量RTPCR反應(yīng)，比較其靈敏度。3此外，對每一個濃度的陽性核酸稀釋液作6次重復(fù)檢測，得到的CT值計算其標準差和變異系數(shù)，驗證該方法的重復(fù)性。2結(jié)果1敏感性和特異性本方法檢測COXB1、COXB2、COXB3和其他腸道病毒靈敏度均達到103COPIESML。對COXB1、COXB2、COXB3和腸道病毒具有較好的特異性，COXB1、COXB2、COXB3引物探針與其他病毒如輪狀病毒、諾如病毒、札如病毒、腺病毒、EV71、COXA16等均無交叉反應(yīng)。2重復(fù)性對每一個濃度的樣本作6個重復(fù)檢測，結(jié)果不同核酸濃度各自的檢測CT值標準差在009～028之間，變異系數(shù)均低于10％，具有較好的重復(fù)性。3結(jié)論所建立的四重熒光定量RRTPCR法可同時檢測并區(qū)分COXB1、COXB2、COXB3和其他未分型的腸道病毒，其檢測快速、準確，具有非常大的臨床推廣應(yīng)用價值。第二部分四重熒光定量RRTPCR法檢測柯薩奇病毒B1、B2、B3及其他腸道病毒方法的臨床應(yīng)用1方法利用所建立的四重熒光定量RRTPCR方法對所采集到的病毒性心肌炎疑似患兒535份糞便標本和43份咽拭子標本進行檢測，對結(jié)果進行統(tǒng)計分析。并隨機選取10份陽性標本進行基因測序，進一步驗證本方法的準確性。2結(jié)果578份標本共檢測到腸道病毒153份，陽性率為265％153578，其中COXB1病毒69份，陽性率為119％69578COXB2病毒18份，陽性率為31％18578COXB3病毒27份，陽性率為47％27578其他類型腸道病毒39份，陽性率為67％39578。隨機選取COXB1、COXB2、COXB3各10份陽性標本進一步測序結(jié)果均與該方法的檢測結(jié)果一致。3結(jié)論本法建立的實時熒光定量PCR技術(shù)簡便快捷、重復(fù)性好、可以實時定量，可對臨床上疑似腸道病毒感染的患兒，特別是小兒病毒性心肌炎患兒提供早期明確診斷，并且可區(qū)分病毒感染的種類及滴度，為臨床治療方案的制定提供參考依據(jù)。

簡介：點擊查看更多若干抗病毒活性化合物的成藥性研究.pdf精彩內(nèi)容。

簡介：遵義醫(yī)學院碩士學位論文皮質(zhì)下不同部位損傷所致失語癥的神經(jīng)心理學特征來自認知神經(jīng)心理學研究的雙分離證據(jù)姓名王美霞申請學位級別碩士專業(yè)神經(jīng)病學指導(dǎo)教師李明20070401縮略詞表皮質(zhì)下失語SUBCORTICALAPHASA，SA認知神經(jīng)心理學COGNITIVENEUROPSYCHOLOGY，CNP‘漢語失語檢查法APHASIABATTERYINCHINESE，ABC法BENTON視覺保持測驗BENTONVISUALRETENTIONTEST，BVRT中國修訂韋氏成人智力量表WECHSLERADULTINTELLIGENCESCALEREVISEDBYCHINAWAISRC電子計算機體層掃描COMPUTERIZEDTOMOGRAPHY，CT操作智商PROCEDUREINTELLIGENCEQUOTIENT，PIQ言語智商VERBALINTELLIGENCEQUOTIENT。VIQALZHEIMERDISEASEAD腦血管疾病CEREBRALVASCULARDISEASE，CVD事件相關(guān)腦電位技術(shù)EVENTRELATEDPOTENTIAL。ERP功能磁共振成像FUNCTIONALMAGNETICRESONANCEIMAGING，F(xiàn)MRI腦磁圖MAGNETOENCEPHALOGRAPHY。MEG重復(fù)經(jīng)顱磁刺激REPETITIVETRANSCRANIALMAGNETICSTIMULATION，RTMS3