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文檔簡介
1、目的:
1、檢測TWIST2在不同級別人腦神經(jīng)膠質瘤中的表達情況;
2、研究TWIST2是否與膠質瘤的惡性程度相關,探討其可能發(fā)生機制。
方法:
1、收集南昌大學第一附屬醫(yī)院神經(jīng)外科2010-2015年手術切除后的60神經(jīng)膠質瘤病例及20例非腫瘤腦組織標本。要求臨床及病理學資料完整。依據(jù)WHO(2007年)分級標準及實驗需要將其分為四組,每組20例。即第一組:非腫瘤組(Control);第二組:W
2、HOII組;第三組:WHOIII組;第四組WHOIV組。使用免疫組織化學檢測各組標本中TWIST2蛋白表達水平。
2、收集南昌大學第一附屬醫(yī)院神經(jīng)外科2014-2015年膠質瘤手術患者新鮮標本61例(其中WHOII組16例、WHOIII組21例、WHOIV組24例,術后已經(jīng)病理證實)及非腫瘤腦組織12例。使用實時熒光定量核酸擴增檢測技術(qRT-PCR)和Westernblot分別檢測各組新鮮標本中TWIST2mRNA和蛋白表
3、達水平。同時使用Westernblot分別檢測各組新鮮標本中E-cadherin、N-cadherin、Vimentin蛋白表達水平。
結果:
1、免疫組化法回顧性分析不同級別膠質瘤中TWIST2蛋白表達,結果顯示:60例膠質瘤中存在TWIST2蛋白表達陽性54例(90%),20例非瘤腦組織中存在TWIST2蛋白表達陽性6例(30%),膠質瘤組較非瘤腦組織TWIST2蛋白表達更高,差異有統(tǒng)計學意義(Z=﹣5.422,
4、P<0.01);WHOIII較WHOII級TWIST2蛋白表達量更高,差異有統(tǒng)計學意義(Z=﹣4.062,P<0.01),WHOIV較WHOIII級TWIST2蛋白表達量更高,差異無統(tǒng)計學意義(Z=﹣0.953,P﹥0.05),WHOIV較WHOII級TWIST2蛋白表達量更高,差異有統(tǒng)計學意義(Z=﹣4.953,P<0.01);.
2、WesternBlot、qRT-PCR方法檢測TWIST2在膠質瘤與非瘤腦組織中的表達,結
5、果均顯示:膠質瘤中存在TWIST2的表達,且其在膠質瘤中的表達較非瘤腦組織表達量更高,差異有統(tǒng)計學意義(P<0.01);且WHOIII、WHOIV.均較WHOII級更高,差異有統(tǒng)計學意義(P<0.01)。
3、WesternBlot檢測新鮮膠質細胞瘤標本中E-cadherin、N-cadherin、Vimentin蛋白的表達水平,結果顯示:膠質瘤中E-cadherin蛋白表達水平與TWIST2蛋白表達水平呈負相關(r=﹣0.9
6、72,P<0.01);膠質瘤中N-cadherin蛋白表達水平與TWIST2蛋白表達水平呈正相關(r=0.971,P<0.01);膠質瘤中Vimentin蛋白表達水平與TWIST2蛋白表達水平呈正相關(r=0.968,P<0.01);
結論:
1、TWIST2在人神經(jīng)膠質細胞瘤中存在表達,且膠質瘤等級與TWIST2的表達量呈正相關。
2、TWIST2基因可能通過上皮-間充質細胞轉化(ePithelial-m
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