L-ficolin基因第八外顯子多態(tài)性與兒童反復呼吸道感染相關性研究.pdf

1、目的：反復呼吸道感染（recurrent respiratory tract infection RRTI）是兒童期常見病，其發(fā)病與多種因素有關，而免疫功能狀態(tài)尤受關注。近年固有免疫系統(tǒng)中的免疫分子L-ficolin與RRTI的關系研究日益增多。L-ficolin是脊椎動物和無脊椎動物體內(nèi)廣泛存在的寡聚蛋白，有調(diào)理素作用，它包括一個膠原樣結構域和一個纖維素樣結構域（fibrinogen-like domain，F(xiàn)BG）。通過纖維素樣結構

2、域L-ficolin可以和革蘭氏陽性及陰性細菌[如化膿性鏈球菌、肺炎鏈球菌、鼠傷寒沙門氏菌、大腸埃希桿菌]等含有N-乙酰葡糖胺（N-acetylglucosamine GlcNAc）糖配基的微生物結合，激活MBL-相關絲氨酸蛋白酶-1、2（MBL-Associated Serine ProteasesMASP-1，2），經(jīng)過甘露聚糖結合凝集素（Inannan binding lectin MBL）途徑激活補體系統(tǒng)，最終消滅病原體，是人體

3、抵御感染第一道防線中的重要免疫分子。編碼L-ficolin的基因（Ficolin2 gene FCN2）位于9q34染色體上，其啟動子及外顯子都具有多態(tài)性。啟動子上三個位點（-986，-602和_4）多態(tài)性與L-ficolin血清濃度有關，第八外顯子多態(tài)性與FBG結合能力有關。在第八外顯子上兩個位點Thr236Met和Ala258Ser發(fā)生非同義氨基酸替換，Thr236Met（C>T）形成的FBG與糖配基結合力較弱，而Ala258Ser

4、（G>T）所形成的FBG與糖配基結合力較強。已有多項研究證實RRTI患兒血清L-ficolin濃度明顯下降，這種降低是先天的，并非疾病所導致的結果，而且啟動子基因多態(tài)性決定著L-ficolin的血清濃度，那么決定FBG結合力強弱的第八外顯子多態(tài)性是否與RRTI相關，F(xiàn)CN2能否成為RRTI致病的候選基因，為了探討這一問題，我們分析了這兩個位點基因型及等位基因頻率在常州地區(qū)漢族RRTI患兒及正常對照組兒童中的分布，以期發(fā)現(xiàn)L-ficoli

5、n基因第八外顯子多態(tài)性是否與RRTI相關，能否成為RRTI的預測基因或其中之一。
　　 方法：采用病例對照研究方法，選取2008年2月～2009年2月間在常州一院就診的江蘇常州市兒童，均為一院兒科病房住院兒童。其中RRTI104例，對照組兒童214例，RRTI診斷標準采用1987年中華兒科學會反復呼吸道感染的標準。通過聚合酶鏈反應（Polymerase Chain Reaction PCR）進行目的DNA擴增，根據(jù)堿基淬滅探針技

6、術檢測FCN2第八外顯子Thr236Met和Ala258Ser位點單核苷酸多態(tài)性（single nucleotide polymorphisms，SNPs）。采用基因計數(shù)法及x2檢驗等統(tǒng)計學方法了解兩組兒童是否存在差異性。
　　 結果：共檢測反復呼吸道感染患兒（病例組）104例，對照組214例。兩組性別、年齡無顯著差異性。Thr236Met位點基因型分布：野生純合子CC型在兩組中分別占91.3％和90.2％，雜合子TC型分別占8

7、.7％和9.8％，兩組中均未檢出突變體純合子基因型-TT?；蛐?，兩組間基因型分布的差異無統(tǒng)計學意義；突變型T等位基因頻率在兩組中分別為4.3％和4.9％，經(jīng)檢驗兩組間無統(tǒng)計學差異（P>0.05）。Ala258Ser位點基因型分布：野生純合子GG基因型分別是63.5％和66.4％，TG雜合子基因型分別是31.7％和31.3％，突變純合子TT基因型分別占4％和2％，兩組間比較基因型分布無顯著差異；突變型T等位基因頻率在兩組中分別為20.7