Ep-CAM在食管黏膜病變和血清中表達(dá)的水平及意義.pdf

1、目的：在世界范圍內(nèi)食管癌發(fā)病率占惡性腫瘤第九位，在我國居于第二位，目前治療食管癌的方法主要是外科手術(shù)結(jié)合放、化療的綜合治療，但食管癌治療效果仍不理想，5年生存率低于30％。如何早期發(fā)現(xiàn)食管腫瘤，及早控制食管癌前病變的發(fā)展，提高生存率，延長食管癌患者生存時(shí)間，一直是醫(yī)療工作者關(guān)注的課題之一。上皮細(xì)胞黏附分子(epithelial cellular adhesion molecule，Ep-CAM)是一種分子量為40kD的Ⅰ型跨膜糖蛋白，屬

2、Ca<'2+>非依賴性黏附分子，由腫瘤相關(guān)鈣信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)蛋白基因(tumor-associated calciumsignal transducer 1，TACSTD1)編碼。其功能可能涉及細(xì)胞間或上皮細(xì)胞基質(zhì)的黏附，與腫瘤的發(fā)生、發(fā)展、轉(zhuǎn)移關(guān)系密切。在國外針對(duì)EP-CAM的報(bào)道，較深入的研究主要集中在乳腺癌，結(jié)腸癌，肺癌的研究上，針對(duì)食管癌的研究為數(shù)不多，也主要是對(duì)食管腺癌的分析。本實(shí)驗(yàn)應(yīng)用免疫組織化學(xué)的方法檢測EP-CAM在正常食管黏膜

3、、食管不典型增生和食管鱗癌組織的表達(dá)，以及應(yīng)用酶聯(lián)免疫(EIJSA)的方法檢測患者血清中EP-CAM的表達(dá)水平，探討其在食管癌監(jiān)測和治療中的指導(dǎo)意義。 方法：食管癌、食管增生的病理組織標(biāo)本和血清來自河北醫(yī)科大學(xué)第四醫(yī)院胸外科和河北省磁縣醫(yī)院。食管癌例32例，其中25例經(jīng)手術(shù)治療；食管不典型增生的病例28例，組織取材為胃鏡咬檢的組織塊；取食管癌手術(shù)遠(yuǎn)端，病理診斷為正常的食管黏膜10例作為正常組織對(duì)照。食管癌患者的血清為術(shù)前1天和術(shù)

4、后第7天患者開始進(jìn)食后采??；食管不典型增生患者的血清為胃鏡檢查前出凝血時(shí)間檢測剩余后的血清；正常血清取11例身體健康的獻(xiàn)血員血清作為正常血清對(duì)照。應(yīng)用免疫組織化學(xué)的方法檢測Ep-CAM在食管癌、癌前病變組織中的表達(dá)；根據(jù)Dako評(píng)分系統(tǒng)，0-----3+的評(píng)分標(biāo)準(zhǔn)：0--不顯色或少于10％的腫瘤細(xì)胞呈現(xiàn)任何水平的陽性染色；1+----超過10％的腫瘤細(xì)胞膜呈現(xiàn)微弱染色，只在部分細(xì)胞膜上染色；2+--+超過10％的腫瘤細(xì)胞膜全部弱染色；3

5、+----超過10％的腫瘤細(xì)胞膜全部呈現(xiàn)強(qiáng)染色。應(yīng)用酶聯(lián)免疫(ELISA)的方法檢測血清Ep-CAM水平。結(jié)果判斷：每個(gè)標(biāo)準(zhǔn)品和標(biāo)本的OD值應(yīng)減去零孔的OD值，根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)品濃度及吸光度做出標(biāo)準(zhǔn)曲線，根據(jù)各待測樣品吸光度在標(biāo)準(zhǔn)曲線上讀出相應(yīng)濃度，再根據(jù)稀釋倍數(shù)計(jì)算出實(shí)際濃度。 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法：應(yīng)用秩和檢驗(yàn)或x<'2>檢驗(yàn)對(duì)Dako評(píng)分?jǐn)?shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析，應(yīng)用t檢驗(yàn)和方差分析對(duì)血清Ep-CAM水平進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析。P≤0.05表明有統(tǒng)計(jì)學(xué)意

6、義。 結(jié)果：1 Ep-CAM在正常食管黏膜、食管不典型增生、食管癌組織中的表達(dá)：在10例正常食管黏膜組織中，Ep-CAM表達(dá)均為陰性，但在28例食管不典型增生組織中，表達(dá)陽性率為42.9％(12/28)，但其表達(dá)強(qiáng)度明顯低于食管癌組織。在25例食管癌的組織中，表達(dá)陽性率為96％(24/25)。三組表達(dá)的陽性率差異明顯(P<0.05)。2 Ep-CAM在正常食管、食管黏膜不典型增生、食管癌患者血清中的表達(dá)：三組間Ep-CAM的水平

7、存在明顯的差異(P<0.01)。食管癌患者血清中的Ep-CAM水平最高，其次為食管不典型增生的患者。食管正常者血清中的。Ep-CAM水平最低。3 食管黏膜不同程度增生患者血清中Ep-CAM表達(dá)水平：將食管黏膜不典型增生患者依據(jù)病理學(xué)診斷標(biāo)準(zhǔn)分為輕、中、重三級(jí)，其中，中、重度不典型增生患者血清中的Ep-CAM表達(dá)水平明顯高于輕度組，經(jīng)統(tǒng)計(jì)學(xué)檢驗(yàn)，差異明顯(P=0.038)。中、重度不典型增生患者兩組間的Ep-CAM表達(dá)水平無明顯差異(P>

8、0.05)。4 血清中Ep-CAM水平與食管癌病理學(xué)特征的關(guān)系：根據(jù)患者術(shù)后的病理學(xué)特征進(jìn)行分組，患者血清中Ep-CAM水平與腫瘤的大小、侵潤深度、分化程度無明顯相關(guān)(p>0.05)；但與腫瘤是否轉(zhuǎn)移明顯正相關(guān)(P=0.006)。5血清中Ep-CAM水平在食管癌切除手術(shù)前后的水平變化：血清中Ep-CAM在食管癌手術(shù)切除后，表達(dá)水平明顯下降(P<0.001)。術(shù)后7天，其水平接近于正常水平。 結(jié)論：1 食管黏膜癌前病變的早期階段即